抗菌药物敏感性试验（药敏试验，AST）是临床微生物实验室最基础也是最重要的检测项目之一。确保药敏试验结果的准确性和可靠性，离不开规范化的质控菌株（Quality Control Strains）管理。本文系统梳理药敏试验中常用ATCC质控菌株的分类、用途和管理要求。
一、药敏试验质控菌株概述
CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute，美国临床和实验室标准协会）M100文件是全球药敏试验质控的权威参考。该文件详细规定了每种药敏试验方法应使用的质控菌株及其预期抑菌圈直径或MIC范围。药敏质控的核心目标是监测试验系统的准确性和精密度，及时发现培养基、试剂或操作中的偏差。
根据试验方法的不同，质控菌株的选择也有所区别。以下是CLSI M100和EUCAST指南中推荐的核心质控菌株。
二、K-B纸片法药敏质控菌株
Kirby-Bauer（K-B）纸片扩散法是最经典的药敏试验方法。根据CLSI M100要求，常规质控应使用以下菌株：
| 菌株编号 | 微生物名称 | 质控用途 | 关键特征 |
|---|---|---|---|
| ATCC 25923 | 金黄色葡萄球菌 S. aureus | K-B纸片法药敏质控（敏感株） | 不产β-内酰胺酶，对青霉素敏感 |
| ATCC 25922 | 大肠埃希菌 E. coli | K-B法/MIC法药敏质控（敏感株） | 革兰阴性杆菌通用质控株 |
| ATCC 27853 | 铜绿假单胞菌 P. aeruginosa | 非发酵菌药敏质控 | 非发酵菌代表株，对多种抗生素敏感 |
K-B法质控的操作要点：菌悬液配制需调至0.5麦氏比浊标准（约1.5×10⁸ CFU/mL），15分钟内完成接种，纸片贴放后35±2°C培养16～18小时，测量抑菌圈直径并与CLSI M100规定的质控范围比对。
三、稀释法药敏质控菌株
肉汤稀释法（包括微量稀释法和常量稀释法）用于测定最低抑菌浓度（MIC），其质控菌株要求如下：
| 菌株编号 | 微生物名称 | 质控用途 | 关键特征 |
|---|---|---|---|
| ATCC 29213 | 金黄色葡萄球菌 S. aureus | 稀释法药敏质控（产β-内酰胺酶） | 产β-内酰胺酶，用于验证含酶抑制剂复合药物 |
| ATCC 29212 | 粪肠球菌 E. faecalis | 肠球菌属药敏质控（敏感株） | 肠球菌代表株，万古霉素敏感 |
稀释法质控的接种浓度需精确调至约5×10⁵ CFU/mL（最终测试浓度），培养条件与K-B法类似，判读结果为MIC值（μg/mL），应与CLSI规定的质控范围一致。
四、特殊试验用质控菌株
1. ESBL（超广谱β-内酰胺酶）试验
| 菌株编号 | 微生物名称 | 用途说明 |
|---|---|---|
| ATCC 35218 | 大肠埃希菌 E. coli | β-内酰胺酶抑制剂复合药物敏感试验质控 |
| ATCC 700603 | 肺炎克雷伯菌 K. pneumoniae | ESBL试验必须使用株（产SHV-18型ESBL） |
ATCC 700603是ESBL确证试验的阳性对照株，携带SHV-18型超广谱β-内酰胺酶，在头孢他啶/克拉维酸和头孢噻肟/克拉维酸复合纸片试验中应显示抑菌圈直径扩大≥5mm。
2. 其他专用质控菌株
| 菌株编号 | 微生物名称 | 用途说明 |
|---|---|---|
| ATCC 51299 | 粪肠球菌 E. faecalis | 高耐氨基糖苷类（HLAR）纸片质控 |
| ATCC 49247 | 流感嗜血杆菌 H. influenzae | 流感嗜血杆菌药敏质控（需使用HTM培养基） |
| ATCC 49619 | 肺炎链球菌 S. pneumoniae | 肺炎链球菌药敏质控（需添加溶血马血清） |
五、消毒与抗菌检测用标准菌株
在消毒产品评价和抗菌材料检测领域，标准菌株的选择受国家标准严格规定。根据GB 15981、GB/T 20944、ISO 22196等标准，常用菌株如下：
| 菌株编号 | 微生物名称 | 检测领域 |
|---|---|---|
| ATCC 19404 | 生孢梭菌 Clostridium sporogenes | 培养基质量控制（厌氧菌指示菌） |
结合"六大经典菌株"（ATCC 6538、9027、10231、8739、16404、6633），以上菌株构成了消毒检测和抗菌评价的完整质控体系。
六、食品安全检测用标准菌株
食品安全微生物检验中，标准菌株用于培养基适用性检查、方法学验证和阳性对照：
| 菌株编号 | 微生物名称 | 检测用途 |
|---|---|---|
| ATCC 14028 | 鼠伤寒沙门氏菌 S. Typhimurium | 食品微生物检验质控（沙门氏菌检测） |
| ATCC 19115 | 单核细胞增生李斯特氏菌 L. monocytogenes | 食品中李斯特菌检测质控 |
| ATCC 29544 | 阪崎肠杆菌 Cronobacter sakazakii | 婴幼儿配方食品检测 |
| ATCC 13124 | 产气荚膜梭菌 C. perfringens | 食品微生物检验 |
| ATCC 33291 | 空肠弯曲菌 C. jejuni | 食品微生物检验 |
七、质控菌株的管理规范
药敏质控菌株的管理应遵循以下原则：
1. 质控频率：CLSI要求每日或每批次药敏试验均应进行质控。若连续20～30个质控结果均在控，可调整为每周质控（如CLSI M100所述）。
2. 代次限制：从ATCC标准株传代至工作株，传代次数不超过5代。每批新工作株启用前应与在控工作株进行平行比对。
3. 储存条件：工作菌株建议-80°C甘油冻存或冻干保存，避免反复冻融。使用前应进行纯度检查和关键生化特性确认。
4. 记录管理：每次质控应记录菌株编号、传代次数、培养基批号、药敏纸片/试剂批号、抑菌圈直径或MIC值、是否在控等信息。出现失控时应立即启动偏差调查。
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