生物安全与来源：生物安全等级为 2 级（BSL-2），具多重耐药致病性，对多种常规抗菌药物耐药，易引发难治性呼吸道感染，操作需在生物安全柜内进行，器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自多重耐药治疗失败的社区获得性肺炎患者痰液样本，生物学特性与临床多重耐药 NTHi 分离株高度一致，可模拟多重耐药感染状态下的药物耐受与定植行为。
形态与培养特性：革兰氏阴性球杆菌，具双因子营养依赖特征：
显微镜形态：菌体呈球杆状（0.3-0.5μm×0.9-1.6μm），单个或短链排列，无芽孢、无鞭毛，革兰氏染色呈均匀淡红色（易脱色，染色时间控制 20-30 秒），无荚膜；
培养要求：兼性厌氧，需 5%-10% CO₂环境，最适培养基为巧克力琼脂、含 X/V 因子的耐药菌选择性琼脂（添加多种低浓度抗生素筛选），最适温度 35-37℃，生长速度中等（24-48 小时形成菌落），普通营养琼脂不生长；
菌落形态：巧克力琼脂上呈圆形、表面光滑略干燥、边缘整齐的灰白色半透明菌落（直径 0.6-1.0mm），质地较硬，挑取时拉丝短，无溶血现象，菌落分散生长（适配耐药菌株单独分离场景）。
生化与药敏特性：生化反应具物种特异性：氧化酶阳性、触酶阳性，发酵葡萄糖、麦芽糖产酸不产气，不发酵乳糖、蔗糖；核心优势在于多重耐药表型：携带 β- 内酰胺酶（TEM 型）且青霉素结合蛋白（PBP3）突变，对氨苄西林、阿莫西林耐药（氨苄西林 MIC 16-32μg/mL），对大环内酯类（阿奇霉素）、磺胺类（复方新诺明）耐药，仅对碳青霉烯类（美罗培南）、新型喹诺酮类（左氧氟沙星）敏感（美罗培南 MIC 0.12-0.25μg/mL），耐药机制覆盖临床常见多重耐药类型，是多重耐药 NTHi AST 质控的可靠参照。
未开封状态：以冻干粉（真空包装，含 10^6-10^7 CFU / 支，含 X/V 因子与耐药表型保护剂）或甘油菌悬液（20% 甘油，10^5 CFU/mL，-80℃专用）供应：
冻干粉：-20℃以下冷冻保存，长期（>6 个月）建议 - 80℃储存，严禁反复冻融（活菌率下降 75% 以上，破坏多重耐药特性），保质期 3 年；
甘油菌：直接 - 80℃保存，室温暴露 20 分钟致活力下降 55%，保质期 2 年，解冻后一次性使用。
复苏后状态：复苏菌液（含 X/V 因子巧克力肉汤培养）2-8℃冷藏 4 天内使用；斜面培养物（含 X/V 因子巧克力琼脂斜面）2-8℃冷藏 2 周内传代，传代需 5% CO₂环境，使用前需镜检确认菌体形态，并通过氨苄西林、阿奇霉素药敏预实验验证多重耐药特性。
复苏操作：生物安全柜内，冻干粉加 1mL 含 X/V 因子巧克力肉汤溶解，37℃ 5% CO₂培养 24-48 小时；待菌液浑浊、镜检见典型球杆菌，且巧克力琼脂形成特征菌落时使用。
传代培养：挑取巧克力琼脂单菌落，划线接种新鲜平板，37℃ 5% CO₂培养 24-48 小时；斜面保存后 2-8℃冷藏，传代≤3 代（避免耐药基因丢失），每次传代后需多重耐药药敏组合测试验证表型。
应用操作：
耐药质控：验证呼吸道样本鉴定系统（质谱、耐药基因 PCR）对多重耐药 NTHi 的检出准确性，避免漏检；
AST 测试：校准多类药物 MIC 值，指导多重耐药感染用药（如优先选择碳青霉烯类）；
耐药研究：用于多重耐药基因协同作用分析、抗多重耐药药物筛选；
试剂验证：验证多重耐药流感嗜血杆菌检测试剂（如耐药基因芯片）的敏感性与特异性。
客服1