ATCC 49917 副嗜血杆菌（Haemophilus paraphrophilus）产品简介
一、产品名称
二、产品特点
生物安全与来源：生物安全等级为 2 级（BSL-2），具口腔感染倾向性，是口腔正常菌群的重要成员，主要定植于牙周袋、牙龈沟等部位，当口腔黏膜屏障受损或免疫力下降时，可引发局部感染甚至经血行播散导致远处感染（如细菌性心内膜炎），操作需在生物安全柜内进行，器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自慢性牙周炎患者牙周袋样本，生物学特性与临床口腔来源的副嗜血杆菌分离株高度一致，其耐受口腔厌氧微环境、黏附牙周上皮细胞的能力显著，可模拟口腔内 “定植 - 致病” 的典型过程，是研究口腔源性感染传播机制的理想模型。
形态与培养特性：革兰氏阴性球杆菌，具单因子营养依赖与非溶血双重鉴别特征：
显微镜形态：菌体呈球杆状（0.3-0.5μm×0.8-1.5μm），单个或短链排列（无聚集生长，区别于 ATCC7901 聚集杆菌），无芽孢、无鞭毛，革兰氏染色呈均匀淡红色（易脱色，染色时间控制 20-30 秒，适配口腔微生物快速染色操作），无荚膜（荚膜染色阴性，区别于荚膜型流感嗜血杆菌）；
培养要求：兼性厌氧，需 5%-10% CO₂环境促进生长，且耐受低氧分压（适配口腔局部厌氧微环境），最适培养基为巧克力琼脂、含 X 因子的口腔专用选择性琼脂（添加万古霉素、两性霉素 B 等抑制口腔常见杂菌，适配牙周袋样本检测），最适温度 35-37℃，生长速度中等（24-48 小时形成清晰菌落，较口腔其他厌氧菌生长更快，适配快速检测需求），普通营养琼脂因缺乏 X 因子不生长（可作为口腔微生物 “营养依赖特性” 教学案例）；
菌落形态：巧克力琼脂上呈圆形、表面光滑湿润、边缘整齐的灰白色半透明菌落（直径 0.5-1.0mm），质地柔软，挑取时易拉丝但无 “黏稠感”（因无荚膜多糖分泌），无溶血现象（接种绵羊血琼脂无溶血环，区别于 ATCC10014 副溶血性嗜血杆菌）；菌落分散均匀生长，无堆叠现象，肉眼观察易与口腔其他嗜血杆菌混淆，需通过营养因子依赖实验进一步确认。
生化与药敏特性：生化反应具物种特异性：氧化酶阳性、触酶阴性（触酶阴性是区别于多数口腔嗜血杆菌的关键特征），发酵葡萄糖、果糖产酸不产气，不发酵乳糖、蔗糖、麦芽糖，且可利用枸橼酸盐作为唯一碳源（该特性是区分于其他口腔单因子依赖嗜血杆菌的核心标志）；核心优势在于口腔感染适配药敏表型：对口腔感染常用治疗药物（阿莫西林 / 克拉维酸、甲硝唑、克林霉素）均敏感，MIC 值高度标准化（阿莫西林 / 克拉维酸 MIC 0.25-1μg/mL），无耐药基因携带（区别于长期使用抗生素的医院获得性耐药株），药敏结果与口腔局部感染治疗响应高度匹配，同时对牙周上皮细胞黏附相关蛋白（如 OmpP2 外膜蛋白）表达稳定，是研究口腔副嗜血杆菌黏附机制的可靠模型。
三、储存环境
未开封状态：以冻干粉（真空包装，含 10^6-10^7 CFU / 支，含 X 因子与口腔菌株保护剂）或甘油菌悬液（20% 甘油，10^5 CFU/mL，-80℃专用）供应：
冻干粉：-20℃以下冷冻保存，长期（>1 年）建议 - 80℃储存，严禁反复冻融（活菌率下降 60% 以上，破坏口腔耐受表型与黏附能力），保质期 4 年（因口腔菌株适应力强，保质期长于部分呼吸道来源嗜血杆菌）；
甘油菌：直接 - 80℃保存，室温暴露 30 分钟致活力下降 40%，保质期 2 年，解冻后可分装少量用于短期实验（适配口腔实验室多次少量使用需求）。
复苏后状态：复苏菌液（含 X 因子的巧克力肉汤培养）2-8℃冷藏 7 天内使用（口腔菌株代谢更稳定，保存时间长于部分敏感菌株）；斜面培养物（含 X 因子的巧克力琼脂斜面）2-8℃冷藏 3 周内传代，传代需 5% CO₂环境，使用前需镜检确认球杆状形态，并通过枸橼酸盐利用实验与阿莫西林药敏预实验验证特性（确保表型未漂移）。
四、使用方法
复苏操作：生物安全柜内，冻干粉加 1mL 含 X 因子的巧克力肉汤溶解，37℃ 5% CO₂培养箱培养 24-48 小时；待菌液浑浊、镜检见典型球杆菌，且接种巧克力琼脂形成均匀菌落时，通过枸橼酸盐利用实验确认特性后使用（复苏成功率≥95%，适配口腔实验室常规操作）。
传代培养：挑取巧克力琼脂上的单菌落，划线接种新鲜巧克力琼脂平板（或口腔专用选择性琼脂），37℃ 5% CO₂培养 24-48 小时；斜面保存后 2-8℃冷藏，传代≤5 代（口腔菌株表型稳定，传代次数适配常规实验需求），每次传代后需通过触酶试验、枸橼酸盐利用实验双重验证典型特性。
应用操作：
口腔质控：用于口腔医疗机构牙周袋拭子、牙槽脓肿分泌物样本鉴定系统（口腔专用质谱数据库、快速生化卡）的性能验证，确保口腔样本中副嗜血杆菌的快速准确检出，避免与口腔其他嗜血杆菌、聚集杆菌混淆；
口腔 AST 校准：校准口腔感染常用 AST 试剂（药敏纸片、半定量药敏板）的 MIC 值，制定口腔副嗜血杆菌感染用药指导方案（如牙周局部用药优先选择甲硝唑与阿莫西林联合使用）；
口腔微生态研究：用于口腔副嗜血杆菌与其他口腔微生物（如牙龈卟啉单胞菌、链球菌）的相互作用研究，分析其在口腔微生态平衡中的角色，为牙周炎等口腔疾病的微生态治疗提供理论依据；
教学培训：作为口腔微生物实验室培训菌株，用于革兰氏染色、菌落形态观察、生化鉴定等基础操作教学，及 “口腔正常菌群与条件致病菌表型差异” 对比教学，帮助学员掌握口腔特殊微生物的鉴别要点。
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