ATCC10973奥斯陆莫拉氏菌Moraxella osloensis

中文名称：奥斯陆莫拉氏菌

拉丁学名：Moraxella osloensis

标准编号：ATCC10973

产品形式：冻干粉（含海藻糖 - 脱脂乳 - 谷氨酸复合保护剂，减少冻干对菌体细胞膜的损伤，维持革兰氏阴性球菌结构稳定，复苏率≥85%）

安全等级：2 级（条件致病性革兰氏阴性球菌，广泛存在于人类呼吸道黏膜、皮肤表面及环境中，免疫正常人群感染风险低，免疫缺陷人群、老年患者或慢性基础病患者易引发呼吸道感染、尿路感染及伤口感染，需在生物安全二级实验室（BSL-2）按规范操作）

模式菌株：非模式菌株（是莫拉氏菌属的代表性菌株，因生化特性稳定、非发酵菌属性典型，成为临床微生物诊断、非发酵菌鉴定及环境微生物研究的重要参照菌株）

分类地位：隶属于莫拉氏菌科、莫拉氏菌属，为专性需氧革兰氏阴性球菌（部分菌株呈短杆状，具有 “球杆状” 多形性特征），自然存在于人类上呼吸道、皮肤、土壤及水体中，是临床非发酵菌感染的常见条件致病菌之一，因首次从挪威奥斯陆地区分离而得名。

菌落形态：在血琼脂培养基上 37℃培养 24-48h，菌落呈灰白色，直径 1-1.5mm，表面光滑、湿润，边缘整齐，质地黏稠，无溶血现象（与溶血链球菌、葡萄球菌区分）；在麦康凯培养基上生长缓慢，形成无色透明小菌落（非发酵菌特性，不分解乳糖，与肠杆菌科发酵菌的红色菌落明确区分）；

菌体形态：革兰氏阴性球菌或球杆状，大小约 0.6-1.0μm，常成对排列（类似双球菌，区别于葡萄球菌的葡萄状排列），部分菌株因培养条件差异呈短杆状（长度 1.0-1.5μm），无芽孢，无鞭毛（不运动，是莫拉氏菌属与其他运动性革兰氏阴性菌的关键区别），革兰氏染色后呈红色，部分菌株具有荚膜（印度墨汁染色可见透明荚膜层），电镜下可见细胞膜外的脂多糖层（内毒素来源）。

专性需氧菌，最适生长温度 35-37℃（人体体温环境下生长最佳），生长 pH 范围 6.0-8.0（耐酸能力较弱，pH<5.5 时生长受抑制），需较高湿度环境（干燥环境中菌体易失活）；

生化特性典型（非发酵菌特征）：不发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖等糖类（与肠杆菌科的发酵特性明确区分），氧化酶试验阳性（快速呈蓝色，是莫拉氏菌属的核心鉴别特征），触酶试验阳性，尿素酶试验阴性，吲哚试验阴性，甲基红试验阴性，V-P 试验阴性，能还原硝酸盐为亚硝酸盐；

致病性与耐药性：携带内毒素（脂多糖），主要通过呼吸道黏膜定植、伤口接触感染，临床常见感染类型包括慢性支气管炎急性发作、肺炎（尤其老年患者）、尿路感染及皮肤软组织感染；对青霉素类、头孢菌素类（如头孢曲松）抗生素敏感性较高，对氨基糖苷类（如庆大霉素）、氟喹诺酮类（如左氧氟沙星）抗生素敏感性良好，较少产生耐药机制（区别于摩根氏摩根氏菌的高耐药性）；

独特代谢特征：能产生氧化酶、触酶等胞外酶，部分菌株可分解过氧化氢，在含过氧化氢的培养基中可观察到气泡产生。

培养条件：

推荐使用血琼脂培养基、巧克力琼脂培养基（含加热红细胞，利于营养吸收，促进生长）或哥伦比亚琼脂培养基，37℃有氧培养 24-48h（需充足氧气，培养箱内通入 5% CO₂可促进菌落生长，缩短培养时间至 24h 左右）；

液体培养选用脑心浸液肉汤（BHI）或营养肉汤（添加 0.5% 酵母提取物），37℃振荡培养（转速 150-180rpm，低速避免菌体破碎）24-30h，菌体浓度可达 10⁸-10⁹CFU/mL，菌液呈轻微浑浊状（因菌体成对排列，浑浊度低于分散生长的杆菌）；

若需验证生化特性，可使用非发酵菌生化鉴定板（如 API 20NE），37℃培养 48h 后观察反应结果（重点关注氧化酶、硝酸盐还原反应）。

活化步骤：

在 BSL-2 实验室生物安全柜内操作，无菌环境下开启冻干粉管，用 0.5-1mL 无菌脑心浸液肉汤（预热至 37℃）充分溶解菌粉，将菌液全部接种至血琼脂平板，37℃（含 5% CO₂）培养 24h；

挑取单个典型灰白色菌落（优先选择边缘整齐、黏稠度中等的菌落），转接至脑心浸液肉汤，37℃振荡培养 24h，获得高活性种子液（操作时避免菌液飞溅，防止气溶胶传播，全程佩戴无菌手套，因菌体无鞭毛，无需过度担心扩散风险）。

保存方法：

未启封冻干粉：2-8℃密封避光保存，有效期 4 年（需保持干燥，潮湿环境易导致菌粉吸潮失效）；

复苏后斜面菌种：4℃密封保存，每 2 个月继代一次，有效期 1.5 个月（频繁继代易导致菌体形态变异，建议每次继代后验证氧化酶活性）；

长期保存：将对数生长期菌液与 30% 无菌甘油按 1:1 体积比混合（甘油浓度不可过高，避免损伤菌体），分装后 - 80℃冷冻保存，或真空冷冻干燥后 - 20℃保存，有效期可达 3-4 年，严禁反复冻融（单次冻融活性损失≥30%，易导致球菌形态变为杆状）。

作为临床微生物实验室的非发酵菌标准参照菌株，用于验证非发酵菌检测方法（如 API 20NE 生化鉴定、质谱鉴定（MALDI-TOF MS）、实时荧光定量 PCR）的准确性，评估诊断试剂（如氧化酶试验试纸、非发酵菌显色培养基）的灵敏度；

用于临床分离株的比对分析，辅助确诊奥斯陆莫拉氏菌感染病例，区分其他非发酵菌（如铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌）引起的感染，符合 CLSI M45《非发酵革兰氏阴性杆菌抗菌药物敏感性试验方法》及 GB/T 4789.41-2020《食品安全国家标准 食品微生物学检验 诺如病毒检验》（延伸适用于环境非发酵菌检测质控）；

作为非发酵菌药敏试验质控菌株，校准抗菌药物敏感性试验（AST）结果，确保临床针对非发酵菌感染用药方案的合理性，尤其适用于基层医院实验室的质量控制。

用于呼吸道感染机制研究，探索奥斯陆莫拉氏菌在呼吸道黏膜的定植规律、与宿主免疫细胞（如巨噬细胞）的相互作用，为慢性呼吸道疾病（如慢性支气管炎）的防控提供理论支撑；

作为非发酵菌代谢机制研究的模型菌株，分析其非发酵特性的分子调控机制（如糖代谢基因表达差异），对比发酵菌与非发酵菌的代谢通路差异，为微生物分类学研究提供基础数据；

用于医院环境感染防控研究，监测奥斯陆莫拉氏菌在医院病房、医疗器械（如呼吸机管道）的分布情况，评估消毒措施（如紫外线消毒、含氯消毒剂擦拭）的效果，制定针对性的感染控制方案。

作为环境非发酵菌监测的指示菌株，用于评估空气、水体（如医院污水）中革兰氏阴性球菌的污染程度，辅助判断环境微生物群落结构稳定性；

用于微生物学教学实验（如革兰氏染色、非发酵菌生化鉴定、氧化酶试验），帮助学生掌握非发酵菌的形态特征、鉴别要点，理解发酵菌与非发酵菌的分类差异；

作为实验室培养基质量控制的标准菌株，验证血琼脂、巧克力琼脂的促生长能力，确认培养基对非发酵菌的适用性。

质量检测：

纯度检测：涂布血琼脂、麦康凯培养基及营养琼脂平板，确保无杂菌污染（细菌、真菌），菌落形态均一，革兰氏染色仅见阴性球菌或球杆状菌体，无杆菌或其他形态微生物；

活性检测：平板计数法测定活菌数，确保≥10⁸CFU / 支；37℃（含 5% CO₂）培养 24h 后，菌落直径可达 1mm 以上，菌体浓度≥10⁸CFU/mL；

特性验证：通过 API 20NE 生化鉴定（氧化酶阳性、不发酵糖类、硝酸盐还原阳性）、16S rRNA 基因测序确认分类地位，采用 CLSI 推荐方法检测耐药表型（对青霉素敏感、对头孢曲松敏感）；

内毒素检测：鲎试剂法测定内毒素含量≤10EU/mL，避免额外生物危害；

随货附带完整 COA（分析报告），质量可追溯。

安全操作规范：

操作需在 BSL-2 实验室进行，实验人员需经致病菌操作培训，穿戴无菌手套、防护口罩、护目镜及实验服，全程在生物安全柜内处理菌液（虽菌体无鞭毛，但需防止气溶胶吸入引发呼吸道刺激）；

实验废弃物（含菌培养基、耗材、防护用品）需经 121℃高压蒸汽灭菌 30min（彻底灭活内毒素）后处理；

若发生菌液泄漏，立即用 1000mg/L 含氯消毒剂覆盖污染区域并作用 30 分钟，通风 30 分钟以上，暴露人员需立即清洗口鼻及皮肤，监测是否出现呼吸道不适或皮肤红肿症状；

收货后 24 小时内，若发现安瓿管破损、菌粉变色（非淡黄色）、复苏后菌落形态异常（如呈杆状为主）或生化特性不匹配（如氧化酶阴性），需在生物安全柜内妥善处理破损品，并按致病性微生物运输规范联系售后办理退换货。