铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa ATCC15442

中文名称：铜绿假单胞菌

拉丁学名：Pseudomonas aeruginosa

标准编号：ATCC15442

产品形式：冻干菌体（含脱脂乳 - 葡萄糖 - 镁盐 - 毒素保护剂，保留强产毒能力与急性感染相关活性，维持生化反应稳定性，复苏率≥85%）

安全等级：2 级（临床急性致病性菌株，主要分离自人类急性肺炎、败血症患者样本，免疫功能正常人群也可能因创伤感染引发急性症状，无多重耐药性，需在 BSL-2 实验室规范操作）

模式菌株：非模式菌株，是铜绿假单胞菌中急性感染关联的代表性菌株，因产毒能力强、致病性显著，为急性感染机制研究、抗毒素药物筛选的核心参照菌株

分类地位：隶属于假单胞菌科、假单胞菌属，革兰氏阴性杆菌，需氧，在临床急性感染研究、毒力因子分析及抗感染急救药物研发中具有重要应用价值。

菌落：营养琼脂上 35-37℃培养 24h，呈 “非黏液型深绿蓝色菌落”（区别于 ATCC19429 的半黏液型，表面干燥无黏液，无拉丝现象），直径 1.8-2.2mm（大于 ATCC19429 的 1.6-2.0mm）；血琼脂上产生强 β- 溶血（溶血范围直径 4.0-4.5mm，显著宽于 ATCC19429 的 3.0-3.5mm，体现急性感染菌株的强溶血活性）；不发酵葡萄糖（氧化型代谢，与 ATCC19429 一致），利用柠檬酸盐能力强（24-26h 内使培养基变色，快于 ATCC19429 的 30-32h，代谢活性更高）。

菌体：革兰氏阴性杆菌（0.6-1.0μm×1.6-3.0μm，略大于 ATCC19429）；无芽孢，有 2-3 根极生鞭毛（运动性强于 ATCC19429，液体培养中扩散迅速，呈均匀浑浊）；氧化酶阳性、触酶阳性（反应结果即时显强阳性，无延迟，与 ATCC19429 一致）；产绿脓素与荧光素能力极强（培养基深绿蓝色浓郁，紫外灯下荧光强度显著高于 ATCC19429，色素合成量是其 1.5 倍以上）；不产生硫化氢，吲哚试验阴性（与 ATCC19429 一致）；无耐药基因（对庆大霉素、头孢他啶、亚胺培南、左氧氟沙星均敏感，仅对氨苄西林耐药，耐药谱与 ATCC19429 一致，但毒力因子表达量更高）。

特性：严格需氧（与 ATCC19429 一致），最适生长温度 35-37℃（适配人体体温，生长速率快于 ATCC19429，24h 菌落直径增长比其多 0.2-0.3mm）；生长 pH 5.0-8.8（与 ATCC19429 一致）；生物膜形成能力弱（72h 仅形成松散薄生物膜，抗药物渗透能力显著弱于 ATCC19429，贴合急性感染 “快速侵袭、少生物膜” 特征）；毒力因子表达量高（外毒素 A、弹性蛋白酶产量是 ATCC19429 的 2-3 倍，体外对上皮细胞损伤率达 80% 以上，远高于 ATCC19429 的 40%）。

培养：用临床急性感染菌专用培养基（如血琼脂、营养丰富型 LB 培养基），35±1℃有氧培养 24±2h（培养条件无需严格标准化，适配临床急性感染样本检测场景，区别于 ATCC27853 的严格质控参数）；液体培养用营养肉汤（添加 0.1% 葡萄糖 + 0.05% 镁盐，诱导毒力因子表达），35℃振荡培养（160rpm，适配强运动性）16-18h，菌体浓度达（1.0±0.1）×10⁹CFU/mL（浓度高于 ATCC19429 的（9.0±1.0）×10⁸CFU/mL，生长速率更快），菌液呈深绿蓝色均匀浑浊（无黏液、无沉淀）。

保存：冻干品 2-8℃保存 3 年（有效期短于 ATCC19429 的 4 年，因毒力因子易失活）；复苏后斜面 4℃保存 1 个月（稳定性弱于 ATCC19429 的 1.5 个月，需缩短继代间隔），每 2 周继代 1 次（连续继代 3 次后需验证毒力活性，继代次数少于 ATCC19429 的 4 次）；长期液氮冷冻（15% 甘油 + 0.1% 镁盐 + 0.02% 毒素保护剂，按 1mL / 支分装），有效期 2-3 年，产色素能力、毒力活性保留率≥80%（低于 ATCC19429 的 85%）。

应用：临床急性感染机制研究（分析外毒素 A、弹性蛋白酶等毒力因子在急性侵袭中的作用，适配急性肺炎、败血症模型）；抗毒力药物筛选（作为强毒力菌株，评估药物对毒力因子的抑制效果，区别于 ATCC19429 的 “抗生物膜药物筛选” 定位）；毒力因子检测方法验证（作为毒力因子定量检测的阳性对照，校准检测试剂灵敏度）；急性感染体外模型构建（用于体外模拟急性肺部感染、血液侵袭环境，测试急救药物的快速抑菌效果）。

安全：BSL-2 实验室生物安全柜内操作，需佩戴护目镜（防范高毒力菌株气溶胶引发的黏膜感染，防护等级略高于 ATCC19429）；使用一次性接种器具（避免交叉污染，因毒力强，污染风险高于 ATCC19429）；实验废弃物 121℃高压灭菌 30min 即可（无需延长灭菌时间）；若发生菌液泄漏，用 2000mg/L 含氯消毒剂擦拭处理（浓度高于 ATCC19429 的 1500mg/L）；暴露者需密切监测体温、呼吸道症状（如高热、剧烈咳嗽），24h 内无异常方可排除风险，无耐药基因扩散风险，适配临床急性感染研究、急救药物研发场景。