ATCC48069大豆疫霉菌Phytophthora sojae

中文名称：大豆疫霉菌

拉丁学名：Phytophthora sojae

标准编号：ATCC48069

产品形式：冻干卵孢子 / 菌丝体（含蔗糖 - 磷酸缓冲液 - 甘油复合保护剂，适配卵菌低温保存特性，保留孢子萌发能力与致病性，复苏率≥75%）

安全等级：农业植物检疫性有害生物（仅对大豆等豆科作物具有强致病性，对人体、动物无任何危害，需在生物安全二级农业实验室规范操作，防止孢子扩散污染农田）

模式菌株：非模式菌株，是大豆疫霉菌中致病型典型的代表菌株，因基因组信息明确、致病机制研究透彻，为植物卵菌病害机制研究、大豆抗病育种及杀菌剂筛选的核心参照菌株

分类地位：隶属于卵菌门、疫霉属，异养真核微生物（非真菌，区别于传统真菌分类），需氧，在植物病理学、农业病害防控及作物抗病基因研究中具有重要应用价值。

菌落：V8 juice 琼脂培养基（卵菌专用培养基）上 25-28℃培养 5-7 天（最适温度低于副拟杆菌的 37℃，培养周期远长于副拟杆菌的 48-72h），呈 “白色棉絮状菌丝菌落”（区别于副拟杆菌的乳白色光滑菌落），直径 3-5cm，菌丝疏松呈放射状扩展，边缘不整齐；无细菌式菌落形态（因属于真核卵菌，以菌丝体和孢子繁殖，与原核的副拟杆菌差异显著）；不发酵糖类（通过吸收植物组织营养生长，与副拟杆菌的发酵代谢完全相反），能分泌果胶酶、纤维素酶等细胞壁降解酶（破坏大豆根部细胞结构，副拟杆菌无此类植物降解酶）。

菌体：营养体为无隔多核菌丝（直径 5-8μm，远粗于副拟杆菌的 0.8-1.2μm），无鞭毛（静止期），游动孢子阶段产生双鞭毛（可在水中游动，副拟杆菌无孢子阶段及运动结构）；有性生殖产生卵孢子（圆形，直径 25-40μm，抗逆性强，是病害传播的重要载体，副拟杆菌无有性生殖过程）；无性生殖产生孢子囊（梨形，释放游动孢子，引发田间病害流行）；不产生短链脂肪酸、维生素等有益代谢物（相反分泌毒素（如大豆疫霉毒素）抑制大豆生长，与副拟杆菌的益生功能完全相反）；无耐药基因（对针对卵菌的杀菌剂敏感，与副拟杆菌的抗生素敏感谱无关联性）。

特性：严格需氧（与副拟杆菌的严格厌氧特性完全相反）；最适生长温度 25-28℃（适配大豆生长的中温环境，副拟杆菌适配人体肠道高温环境）；生长 pH 6.0-7.0（偏中性，适配土壤微环境，副拟杆菌的肠道 pH 适配范围一致）；大豆专性致病性强（仅侵染大豆根系及幼苗，通过识别大豆感病基因进入体内，引发根腐病、茎基腐病，副拟杆菌无植物致病性）；依赖植物活体或死体营养（无法在无植物组织的合成培养基上长期生长，副拟杆菌可在人工培养基上稳定繁殖）。

培养：用卵菌专用培养基（V8 juice 琼脂 + 0.02%β- 谷甾醇，促进菌丝生长与孢子形成），25±1℃有氧培养 5-7 天（需避光培养，防止孢子过早萌发，副拟杆菌无需避光）；液体培养用 V8 juice 液体培养基，25℃静置培养 7-10 天，菌丝体干重可达 0.5-1.0g/L（无明确菌体浓度计数，因以菌丝体生长为主，副拟杆菌以单细胞浓度计量），培养液呈浑浊状（含菌丝碎片与孢子，副拟杆菌为单细胞浑浊）。

保存：冻干卵孢子 4℃密封干燥保存 5 年（需干燥环境，副拟杆菌需厌氧环境）；菌丝体斜面 25℃培养 3 天后转 4℃保存 1-2 个月（保存时间短于副拟杆菌的 1 个月，因菌丝易老化），每 1 个月继代 1 次（需使用新鲜培养基，防止致病力衰退）；长期保存采用液氮冷冻（15% 甘油 + 0.1mol/L 磷酸缓冲液，卵孢子悬浮液分装），有效期 10 年，孢子萌发率与致病性保留率≥80%（副拟杆菌保留率为代谢活性，此为致病功能保留）。

应用：植物病害机制研究（分析其效应蛋白与大豆抗病基因的互作机制，解析卵菌致病的分子基础）；大豆抗病育种（作为接种菌株，筛选大豆抗病品种，评估品种抗病性等级）；杀菌剂筛选（测试新型卵菌杀菌剂的抑制效果，确定最佳作用浓度）；植物检疫检测（作为阳性对照，建立大豆疫霉菌快速检测方法，防止病害跨区域传播，副拟杆菌无检疫应用场景）。

安全：农业生物安全二级实验室操作，需佩戴防尘口罩（防止孢子气溶胶扩散，副拟杆菌无需防护气溶胶）；实验器具需高温灭菌（121℃30min，杀灭卵孢子，与副拟杆菌灭菌要求一致）；泄漏后需用 5% 次氯酸钠溶液擦拭消毒（杀灭散落孢子，副拟杆菌泄漏无需特殊消毒）；操作人员无需医学监测（对人体无害），需防止培养基残渣、孢子污染农田，适配植物病理实验室、农业科研机构及种子检疫部门场景。