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ATCC29061松鼠葡萄球菌Staphylococcus sciuri

一、基础信息ATCC29061 松鼠葡萄球菌隶属于葡萄球菌科葡萄球菌属,经 ATCC 多维度标准化鉴定(含 16S rRNA 基因测序、dnaJ 基因分型及生化表型验证),为典型广谱动物源葡萄球菌(宿主涵盖松鼠、兔、牛、禽类等,偶见于人类皮肤表面),属于凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)。该菌株遗传背景清晰可追溯,长期传代后核心特性(凝固

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一、基础信息
ATCC29061 松鼠葡萄球菌隶属于葡萄球菌科葡萄球菌属,经 ATCC 多维度标准化鉴定(含 16S rRNA 基因测序、dnaJ 基因分型及生化表型验证),为典型广谱动物源葡萄球菌(宿主涵盖松鼠、兔、牛、禽类等,偶见于人类皮肤表面),属于凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)。该菌株遗传背景清晰可追溯,长期传代后核心特性(凝固酶阴性、耐盐性强、广谱宿主适应性)稳定无变异,核心特征为革兰氏阳性球菌、兼性厌氧、环境耐受性强。其专属菌株编号可实现实验全流程溯源,是松鼠葡萄球菌宿主适应机制研究、动物源微生物区系调查、兽用抗菌药物耐药性监测及人兽共患病低风险菌株对照研究的核心参照菌株,能保障不同实验室间广谱动物源葡萄球菌相关实验数据的精准比对,尤其适合兽医微生物学、环境微生物检测等场景的标准化研究。
二、生物学特征
  1. 形态:革兰氏阳性球菌,显微镜下呈疏松葡萄串状排列(排列松散度显著高于腐生葡萄球菌),无芽孢与鞭毛,部分菌株表面具极薄荚膜(需特殊染色才能观察),大小约 0.7-1.1μm。在普通营养琼脂上形成直径 1.0-2.0mm 的乳白色至淡黄色菌落,质地柔软、表面光滑且具轻微黏性(挑取时不易拉成丝,与腐生葡萄球菌的无黏性菌落区分),边缘整齐或轻微锯齿状;在血琼脂培养基上表现为 γ- 溶血(不溶血,与腐生葡萄球菌一致);在含 10% 氯化钠的高盐培养基上可正常生长(耐盐性强于腐生葡萄球菌的 7.5% 耐盐上限),且不发酵甘露醇(培养基不变色);在麦康凯培养基上不生长(与革兰氏阴性肠道菌区分),此高耐盐性是关键鉴别标志。

  1. 生理生化:兼性厌氧微生物,最适生长温度 30-35℃(适应多种动物体温,25-40℃范围内均可生长),最适 pH 值 6.8-7.5,对营养要求极低,在低营养培养基(如含 0.02% 碳源的基础培养基)中仍可生长,生长速度快于腐生葡萄球菌。生化反应中,触酶试验阳性(强阳性反应,气泡生成量大),凝固酶试验阴性(与腐生葡萄球菌一致),氧化酶试验阴性,硝酸盐还原试验阳性,甲基红试验阴性,VP 试验阳性(与腐生葡萄球菌的 VP 阴性区分);关键生化特性为氧化利用葡萄糖(非发酵型代谢,与腐生葡萄球菌的发酵型代谢区分),尿素酶试验阴性(与腐生葡萄球菌的尿素酶阳性明确区分);糖类发酵方面,可发酵蔗糖(产酸不产气),不发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、乳糖;毒力特性上,仅携带少量基础毒力基因(如生物膜形成基因 icaA,表达量低),对宿主细胞黏附能力弱,主要存在于动物皮肤、黏膜及环境中,极少引发动物或人类感染(仅免疫功能极度低下人群偶发局部感染),无明确人兽共患传播风险(风险低于腐生葡萄球菌)。

三、培养条件
  1. 培养基:常规培养优先选用营养琼脂或 LB 培养基(30-35℃培养 18-24 小时,无需延长培养);动物样本分离(如松鼠皮肤拭子、兔鼻腔样本)推荐使用血琼脂培养基(观察不溶血特性);与腐生葡萄球菌鉴别需使用 10% 氯化钠高盐培养基(验证高耐盐性)与尿素培养基(验证尿素酶阴性);药物敏感性试验需采用 MH 培养基(符合 CLSI 兽医标准);环境样本分离可选用低营养基础培养基(筛选低营养耐受菌株)。

  1. 操作:固体培养置于 30-35℃恒温培养箱静置 18-24 小时,可形成形态典型的单菌落(需重点观察耐盐性);液体培养采用 30-35℃、150-180rpm 摇床振荡培养 16-20 小时,培养后期菌液呈均匀浑浊状(浊度高于腐生葡萄球菌),菌浓度可达 10⁹-10¹⁰CFU/mL,且能最大程度保留高耐盐特性。传代次数建议控制在 5 代以内,温度波动需≤±1℃,避免因传代过多导致耐盐性减弱或代谢特性改变。

四、保存条件
  1. 短期(1-2 周):取 30-35℃培养 18 小时的纯培养菌株(需确认凝固酶阴性、高耐盐性、尿素酶阴性),接种至营养琼脂斜面培养基,30℃培养 12 小时后,密封斜面管口置于 4℃冰箱冷藏保存。每 4-5 天观察一次菌株状态(观察频率低于腐生葡萄球菌),若发现菌落干燥、污染,需及时重新接种(30-35℃复壮),防止菌株失活。

  1. 长期(3 年以上):推荐两种高效保存方法:①冷冻干燥保存法:取对数生长期菌液(OD600=0.8-1.0,培养 16 小时),与含 10% 脱脂乳 + 0.5% 酵母提取物的复合保护剂按 1:1 体积比充分混匀,分装至无菌冷冻管(每管 0.5mL),经 - 20℃预冻 3 小时、-80℃冷冻 6 小时梯度降温后进行冷冻干燥,干燥完成后置于 - 80℃冰箱保存,保存期限可达 5-8 年,复苏后高耐盐性保留率≥98%;②甘油冷冻保存法:将对数生长期菌液与无菌甘油(终浓度 20%,与腐生葡萄球菌一致)混合均匀,分装至无菌冷冻管(每管 1mL),直接放入 - 80℃冰箱保存,保存期限 3-5 年,操作简便(复苏时需接种至 10% 高盐培养基验证耐盐性)。长期保存需每 12 个月复苏一次,复苏后通过革兰氏染色、凝固酶试验、高耐盐性检测、尿素酶试验及代谢类型鉴定,全面确认菌株纯度、生理活性与核心特性,确保后续实验使用效果。



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