形态与生化：菌体呈短杆状或球杆状，大小（0.3-0.5）μm×（1.0-2.0）μm，两端钝圆，无芽孢，无鞭毛（无运动性），常呈单个、成对或短链状排列，部分菌株可形成荚膜（需通过特殊染色观察）。最适生长温度 35-37℃，兼性厌氧（需在含 5%-10% CO₂的环境中生长更佳，可促进荚膜形成与营养吸收），适宜 pH 7.2-7.6；核心生长特性为 “嗜血”，需在培养基中添加 X 因子（氯化血红素）和 V 因子（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，NAD）才能生长（与其他嗜血杆菌属菌种的关键区分点）；生化特征具特异性：发酵葡萄糖、半乳糖产酸（不产气），不发酵乳糖、蔗糖，氧化酶阳性，触酶阳性，硝酸盐还原试验阳性，吲哚试验阴性，尿素酶试验阴性，这些稳定的生长需求与生化反应是流感嗜血杆菌精准鉴别的核心依据。
致病性相关：属于条件致病菌，主要定植于人类鼻咽部黏膜，是儿童与免疫功能低下人群呼吸道感染的常见病原体；根据荚膜抗原差异可分为 a-f 6 个血清型，其中 b 型（Hib）致病性最强，可引发脑膜炎、肺炎、会厌炎等严重侵袭性疾病，非荚膜型（无荚膜菌株）则多导致慢性支气管炎、中耳炎等局部感染。ATCC 10211 为非荚膜型菌株，毒力中等，携带黏附素、脂多糖等毒力因子，主要用于流感嗜血杆菌致病机制（如鼻咽黏膜黏附、炎症反应诱导）研究，及临床呼吸道感染检测的阳性对照株。
培养：需添加特殊生长因子且适宜 CO₂环境，推荐使用含 5%-10% CO₂的培养箱。推荐培养基包括：巧克力琼脂（含 X 因子和 V 因子，通过加热绵羊血破坏红细胞释放因子，用于菌株活化与纯培养，菌落呈圆形、半透明至乳白色，直径 0.5-1.0mm，边缘整齐，质地柔软，培养 24-48 小时后菌落表面光滑有光泽）、嗜血杆菌选择性琼脂（在巧克力琼脂基础上添加万古霉素、杆菌肽等抗生素，抑制杂菌生长，适用于临床标本中流感嗜血杆菌的分离）、脑心浸液肉汤（添加 X 因子和 V 因子，用于增菌培养，37℃ CO₂环境振荡培养 18-24 小时后菌液呈轻度浑浊）。培养过程中需避免温度波动（低于 30℃或高于 40℃易导致菌株生长停滞），且 CO₂浓度需稳定，确保菌株正常生长与特性表达。
保存：短期保存（1-2 周）：将活化后的纯菌株接种至巧克力琼脂斜面，37℃ CO₂环境培养 24 小时后，立即密封斜面管口（防止培养基水分流失与污染），置于 4℃冰箱冷藏，期间需每 3-5 天观察 1 次（因菌株对营养需求高，低温保存易失活），若出现菌落萎缩、变色或污染需立即重新活化；长期保存（1 年以上）：采用 - 80℃甘油冷冻保存（20% 无菌甘油与对数期菌液按 1:1 体积混合，菌液需取自添加 X/V 因子的新鲜肉汤，分装至无菌冻存管，避免反复冻融），或冻干保存（以 10% 脱脂乳 + 0.1% V 因子为保护剂，冻干过程需维持低温干燥，冻干后置于 - 20℃以下环境）。复苏时，将冻存菌液或冻干菌粉接入含 X/V 因子的脑心浸液肉汤，37℃ CO₂环境振荡培养 18-24 小时（转速 150-200rpm），待菌液浑浊后转接巧克力琼脂纯化，复苏后需通过生长因子需求试验（验证需 X+V 因子才能生长）与生化反应（如发酵葡萄糖）验证，确保菌株特性未改变。
应用：在临床医学领域，作为呼吸道感染检测的质控株，用于验证巧克力琼脂、嗜血杆菌选择性培养基的性能（促生长能力与选择性），及生化鉴定试剂盒（如 API NH）、质谱检测平台的准确性，帮助实验室快速诊断流感嗜血杆菌感染；在疫苗研发领域，用于流感嗜血杆菌抗原性分析（如荚膜多糖提取与鉴定）、疫苗免疫原性评价的基础对照；在科研领域，用于流感嗜血杆菌致病机制研究（如黏附素功能、脂多糖毒性），及抗菌药物（如氨苄西林、头孢曲松）体外活性评价，为临床用药提供参考；在教学领域，用于微生物学实验，演示需特殊生长因子细菌的培养方法、革兰氏阴性杆菌的形态观察及生化鉴别，帮助学习者掌握嗜血杆菌属细菌的核心特性。
安全：需在生物安全二级（BSL-2）实验室进行操作（因可引发侵袭性感染，尤其对儿童风险较高）；涉及菌液移液、接种、离心等可能产生气溶胶的操作时，需在生物安全柜内进行，操作人员需佩戴无菌手套、口罩、护目镜，避免皮肤接触菌液或吸入含菌气溶胶；实验后，所有污染耗材（培养皿、吸头、离心管、接种环）需经 121℃高压灭菌 30 分钟以上（确保彻底杀灭菌株），实验台面用含氯消毒剂（有效氯 1000mg/L）擦拭消毒，再用 75% 乙醇二次消毒；菌株储存需单独存放于专用 - 80℃冰箱，冻存管清晰标注 “ATCC 10211 流感嗜血杆菌（非荚膜型）- 致病菌”、保存日期及操作人员，严禁与其他呼吸道病原体（如肺炎链球菌）混合存放，防止交叉污染与实验室感染。
客服1