形态与生化：菌体呈短杆状或球杆状，大小（0.3-0.5）μm×（1.0-2.0）μm，两端钝圆，无芽孢，无鞭毛（无运动性），常单个、成对或短链状排列，部分菌株可见明显荚膜（经荚膜染色后清晰可见）。最适生长温度 35-37℃，兼性厌氧（含 5%-10% CO₂的环境可显著提升生长速率，促进荚膜合成与生化反应稳定性），适宜 pH 7.2-7.6；核心生长依赖 X 因子（氯化血红素）与 V 因子（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，NAD），仅能在双因子共存的培养基中繁殖（与仅需 V 因子的副流感嗜血杆菌形成核心鉴别）；生化特征稳定：发酵葡萄糖、半乳糖产酸（不产气），不发酵乳糖、蔗糖、甘露醇，氧化酶阳性，触酶阳性，硝酸盐还原试验阳性，吲哚试验阴性，尿素酶试验阴性，这些特性是菌株精准鉴别的核心依据。
致病性相关：属于条件致病菌，主要定植于人类鼻咽部黏膜，是儿童、老年人及免疫功能低下人群侵袭性感染的重要病原体；该菌株为荚膜 f 型（Haemophilus influenzae type f, Hif） ，虽既往感染率低于 b 型（Hib），但近年来在全球范围内儿童侵袭性感染（如肺炎、败血症、脑膜炎）中的检出率呈上升趋势，需重点关注。ATCC 49766 携带黏附素（如 Hap 黏附蛋白）、脂多糖（LPS）等毒力因子，且对部分 β- 内酰胺类抗菌药物存在固有敏感性差异，主要用于流感嗜血杆菌 f 型致病机制研究、血清型特异性检测方法建立及临床侵袭性感染诊断的阳性对照株。
培养：需双因子营养支持与适宜 CO₂环境，推荐使用含 5%-10% CO₂的培养箱。推荐培养基包括：巧克力琼脂（通过加热绵羊血释放 X、V 因子，用于菌株活化与纯培养，菌落呈圆形、半透明至乳白色，直径 0.5-1.0mm，边缘整齐，质地柔软，培养 24-48 小时后表面光滑有光泽，荚膜菌株菌落更饱满）、嗜血杆菌选择性琼脂（在巧克力琼脂基础上添加万古霉素、杆菌肽等抗生素，抑制革兰氏阳性菌及杂菌生长，适用于临床标本中流感嗜血杆菌的分离纯化）、脑心浸液肉汤（添加 X 因子与 V 因子，用于菌株增菌，37℃ CO₂环境振荡培养 18-24 小时后，菌液呈中度浑浊，OD600 值约 0.4-0.5）。培养过程中需严格控制温度，避免低于 32℃或高于 38℃（易导致菌株生长停滞、荚膜脱落）；CO₂浓度波动需控制在 ±2% 以内，防止影响菌株生化特性与药敏结果稳定性。
保存：短期保存（1-2 周）：将纯化后的菌株接种至巧克力琼脂斜面，37℃ CO₂环境培养 24 小时后，密封斜面管口（防止培养基水分流失与杂菌污染），置于 4℃冰箱冷藏，期间每 3-4 天观察 1 次（因菌株对营养需求高，低温保存易失活），若出现菌落萎缩、变色或污染，需立即重新活化；长期保存（1 年以上）：采用 - 80℃甘油冷冻保存（20% 无菌甘油与对数期菌液按 1:1 体积混合，菌液需取自新鲜双因子肉汤，分装至无菌冻存管，避免反复冻融），或冻干保存（以 10% 脱脂乳 + 0.1% V 因子为保护剂，冻干过程维持低温干燥，冻干后置于 - 20℃以下干燥环境）。复苏时，将冻存菌液或冻干菌粉在无菌条件下接入含双因子的脑心浸液肉汤，37℃ CO₂环境振荡培养 18-24 小时，待菌液浑浊后转接巧克力琼脂纯化，复苏后需通过 “双因子需求试验”（分别验证对 X、V 因子的依赖性）与血清型鉴定（如乳胶凝集试验、PCR 血清型分型），确保菌株特性未发生改变。
应用：在临床检测领域，作为流感嗜血杆菌 f 型感染检测的质控株，用于验证巧克力琼脂、嗜血杆菌选择性培养基的促生长能力与选择性，校准 AST 实验（纸片扩散法、肉汤稀释法）中氨苄西林、头孢噻肟等抗菌药物的抑菌圈直径或最低抑菌浓度（MIC），确保临床检测结果的准确性；在科研领域，用于流感嗜血杆菌 f 型致病机制研究（如荚膜多糖的致病作用、黏附素与宿主细胞的相互作用），及 β- 内酰胺酶耐药基因（如 blaROB）检测、耐药机制（青霉素结合蛋白突变）分析，同时可用于新型抗流感嗜血杆菌药物的体外活性评价；在血清学研究领域，用于流感嗜血杆菌 f 型荚膜多糖提取、纯化及抗原性分析，助力 f 型特异性疫苗研发与抗体检测方法建立；在教学领域，用于演示 “细菌营养需求差异”“荚膜染色技术”“血清型鉴定流程” 等实验，帮助学习者掌握嗜血杆菌属细菌的核心特性与临床检测关键技术。
安全：需在生物安全二级（BSL-2）实验室操作（因可引发儿童侵袭性感染，且存在耐药性传播风险）；涉及菌液移液、离心、平板涂布等可能产生气溶胶的操作时，需在生物安全柜内进行，操作人员需佩戴无菌手套、口罩、护目镜，避免皮肤直接接触菌液或吸入含菌气溶胶；实验结束后，所有污染耗材（培养皿、移液器吸头、离心管、接种环）需经 121℃高压灭菌 30 分钟以上（确保彻底杀灭菌株），实验台面用含氯消毒剂（有效氯 1000mg/L）擦拭消毒，再用 75% 乙醇二次消毒；菌株储存需单独存放于专用 - 80℃冰箱，冻存管外清晰标注 “ATCC 49766 流感嗜血杆菌（f 型荚膜）- 致病菌”、保存日期及耐药相关信息，严禁与其他血清型流感嗜血杆菌（如 a 型、b 型）或呼吸道病原体（如肺炎链球菌）混合存放，防止交叉污染与耐药基因扩散，保障实验室生物安全。
客服1