形态与生化：菌体呈短杆状或球杆状，大小（0.5-1.0）μm×（1.0-2.2）μm，两端钝圆，无芽孢，无鞭毛（无运动性，与有鞭毛的大肠埃希氏菌形成明显鉴别），多数菌株具较厚荚膜（经荚膜染色呈黏液状，菌落形态特征显著）。最适生长温度 35-37℃，兼性厌氧（有氧环境生长更旺盛，菌落形成速度快；无氧时可通过发酵葡萄糖产酸供能），适宜 pH 7.0-7.8；生化特征与非耐药产酸克雷伯菌一致：发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖均产酸产气，氧化酶阴性，触酶阳性，硝酸盐还原试验阳性，吲哚试验阳性（与肺炎克雷伯菌 “吲哚试验阴性” 的核心差异点，是属内种间鉴别的关键标志），VP 试验阳性，可利用柠檬酸盐作为唯一碳源，不产生硫化氢；核心差异在于耐药特性 —— 对青霉素类、头孢菌素类（如头孢噻肟、头孢曲松）等 β- 内酰胺类药物呈耐药性，对碳青霉烯类药物（如亚胺培南）敏感，耐药表型稳定，是其与非耐药株（如 ATCC43086）的核心区分点。
致病性相关：属于条件致病菌，自然定植于人类肠道、呼吸道黏膜及环境中，是人体正常菌群组成部分；因携带 ESBLs 耐药基因，其临床感染风险高于非耐药株 —— 当机体免疫功能低下（如老年人、重症监护患者、长期使用抗生素人群）时，可引发尿路感染（如膀胱炎、肾盂肾炎）、呼吸道感染（如肺炎、支气管炎），甚至败血症、腹腔感染等全身性感染，且因耐药性导致治疗难度增加，部分菌株还可产生细胞毒素引发抗生素相关性肠炎。ATCC 49131 毒力特性明确，ESBLs 耐药表型稳定，主要用于与非耐药产酸克雷伯菌的耐药性对比研究、临床 ESBLs 阳性产酸克雷伯菌感染检测的阳性对照及耐药机制研究的模式株。
培养：无需特殊气体环境，常规有氧培养即可，需通过含特定抗生素的培养基验证耐药特性。推荐培养基包括：营养琼脂（NA，用于菌株活化与纯培养，菌落呈乳白色、黏液状，表面光滑湿润，直径 2.0-3.0mm，挑取时呈拉丝状，具典型克雷伯菌菌落特征）、麦康凯琼脂（MAC，因发酵乳糖，菌落呈粉红色黏液状，直径 1.5-2.5mm，边缘整齐，可快速区分于非发酵乳糖肠道致病菌）、含头孢噻肟的选择性培养基（头孢噻肟浓度为 1μg/mL，用于验证 ESBLs 耐药特性，仅耐药株可生长，非耐药株被抑制，便于快速筛选）、TSB 肉汤（用于增菌培养，37℃振荡培养 18-24 小时后，菌液呈中度至重度浑浊，因荚膜成分导致黏稠度略高，活菌数可达 10^8-10^9 CFU/mL）。37℃培养 16-24 小时后，各类培养基上形成典型黏液状菌落，含药培养基上的生长情况可直接验证耐药特性。
保存：短期保存（1-3 周）：将活化后的纯菌株接种至营养琼脂斜面，37℃培养 12-16 小时后，密封斜面管口（防止培养基水分流失与杂菌污染，避免黏液状菌落脱水萎缩），置于 4℃冰箱冷藏，期间每 1-2 周观察 1 次，且需定期（每 2 周）转接含头孢噻肟的培养基验证耐药特性，若出现菌落变色、污染或耐药性丢失，需立即重新活化；长期保存（1 年以上）：采用 - 80℃甘油冷冻保存（20% 无菌甘油与对数期菌液按 1:1 体积混合，菌液需取自新鲜 TSB 肉汤，分装至无菌冻存管，避免反复冻融 —— 反复冻融会破坏荚膜结构与耐药基因稳定性），或冻干保存（以 10% 脱脂乳为保护剂，冻干过程维持低温干燥，冻干后置于 - 20℃以下环境）。复苏时，将冻存菌液或冻干菌粉接入 TSB 肉汤，37℃振荡培养 8-10 小时（转速 180-200rpm），待菌液浑浊后，先转接营养琼脂纯化，再接种含头孢噻肟的培养基验证耐药特性，同时通过生化反应（如吲哚试验阳性、乳糖发酵产气）确认菌株身份，确保耐药表型与菌种特性均未改变。
应用：在临床检测领域，作为 ESBLs 阳性产酸克雷伯菌感染诊断的耐药质控株，用于验证 AST 实验（纸片扩散法、肉汤稀释法、自动化药敏仪）检测 ESBLs 的准确性，校准头孢噻肟、头孢曲松等抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC），同时用于验证 ESBLs 检测试剂盒（如胶体金试纸条、实时荧光 PCR 试剂盒）的特异性与敏感性，帮助实验室准确识别耐药菌株，避免误诊导致的治疗失败；在科研领域，用于产酸克雷伯菌 ESBLs 耐药机制研究（如耐药基因 blaCTX-M、blaTEM 的表达调控、耐药蛋白功能分析），及新型抗 ESBLs 药物（如 β- 内酰胺酶抑制剂复方制剂）的体外活性评价，为耐药菌治疗药物研发提供参考；在食品与环境检测领域，作为环境中耐药菌监测的参考株，评估耐药菌在医院、社区环境中的传播风险；在教学领域，用于微生物学耐药实验教学，演示 “耐药菌筛选方法”“ESBLs 检测流程”，帮助学习者理解细菌耐药机制与临床耐药菌防控要点。
安全：需在生物安全二级（BSL-2）实验室操作，且需强化耐药菌管控措施（因携带 ESBLs 耐药基因，存在耐药性交叉传播风险）；涉及菌液移液、离心、平板涂布等可能产生气溶胶的操作时，必须在生物安全柜内进行，操作人员需佩戴无菌手套、口罩、护目镜，必要时穿防护服，避免皮肤接触菌液或吸入含菌气溶胶（黏液状菌液易形成飞沫，增加传播风险）；实验后，所有污染耗材（培养皿、吸头、离心管、接种环）需经 121℃高压灭菌 60 分钟以上（确保彻底杀灭菌株，防止耐药基因扩散），实验台面用含氯消毒剂（有效氯 2000mg/L）擦拭消毒，作用 30 分钟后再用 75% 乙醇二次消毒；菌株储存需单独存放于专用 BSL-2 实验室冰箱，冻存管外清晰标注 “ATCC 49131 产酸克雷伯菌（ESBLs 阳性，头孢噻肟耐药）”、保存日期及操作人员，严禁与非耐药菌、其他耐药菌（如产 KPC 酶菌株）混合存放，储存环境需定期消毒，防止交叉污染；实验结束后，操作人员需严格按照生物安全规范进行手部消毒与衣物清洁，避免携带耐药菌出实验室。
客服1