生物安全与来源:生物安全等级为 1 级,无强致病性,常规实验室规范操作(超净台接种、无菌耗材使用、操作后器具灭菌)下,对操作人员及环境无危害。该菌株分离自禽类肠道(如鸡肠道内容物),其生物学特性与禽源肠道正常菌群高度契合,既能模拟禽类肠道中鸡肠球菌的生理代谢状态,也可用于研究跨物种传播场景下(如禽肉制品加工)肠球菌的表型变化,是连接禽源微生物研究与人类健康防护的关键菌株。
形态与培养特性:为革兰氏阳性球菌,显微镜下多呈短链状排列(链长介于粪肠球菌与屎肠球菌之间),部分呈成对分布,无芽孢、无鞭毛,不具备自主运动能力,可通过链状形态与葡萄球菌(葡萄状簇集)快速区分。兼性厌氧,对营养需求较低,在脑心浸液琼脂(BHI)、胰酪大豆琼脂(TSA)、血琼脂等常规培养基中均能良好生长;最适生长温度为 35-37℃(与哺乳动物源肠球菌一致),可耐受 10-45℃的宽温度范围,同时能在含 6.5% 氯化钠的高盐环境及 pH 9.6 的碱性环境中存活,符合肠球菌属的共性特征。菌落形态为圆形、表面光滑、颜色呈乳白色,直径约 0.6-1.2mm(略小于粪肠球菌),在血琼脂平板上多表现为 γ- 溶血(无溶血环),少数情况下可能出现微弱 α- 溶血,这一溶血特性与屎肠球菌相似,需通过生化特征进一步区分。
生化特性:生化反应稳定且具有物种特异性,是鸡肠球菌鉴别的关键标志:能发酵葡萄糖、蔗糖产酸不产气,部分菌株可发酵乳糖,不发酵甘露醇、山梨醇、棉子糖;触酶试验结果为阴性,胆汁七叶苷试验、精氨酸双水解试验均为阳性,PYR(吡咯烷酮芳基酰胺)试验阳性,且能分解鼠李糖(这一特征与粪肠球菌、屎肠球菌存在明显差异)—— 这些生化特征是区分鸡肠球菌与其他常见肠球菌的核心指标,确保其在微生物鉴定实验中可作为可靠的标准对照。
未开封状态:产品主要以冻干粉形式进行真空密封包装,每支冻干粉含一定数量的活菌(具体活菌数量以 ATCC 官方标注为准),未开封时需置于 - 20℃以下冷冻环境保存;若需长期储存(超过 6 个月),建议放入 - 80℃冰箱,可最大程度保持菌株活性。储存过程中严禁反复冻融,反复冻融会破坏菌株细胞结构,导致活菌数量大幅减少,同时可能影响菌株的生化及药敏等关键表型,进而干扰实验结果的可靠性。冻干粉保质期以 ATCC 官方标注为准,通常为 2-3 年,在规范储存条件下,菌株活性衰减缓慢。
复苏后状态:菌株复苏后的菌液(经 TSB 或 BHI 培养基培养)或斜面培养物(接种于 TSA 斜面),需在 2-8℃冷藏环境中保存。由于该菌株对低温环境的耐受性略低于人源肠球菌,长期冷藏易因代谢产物积累导致活性下降,因此建议 5-7 天内进行一次传代培养,传代时需使用新鲜的培养基,确保菌株的生物学特性保持稳定,为后续实验提供可靠的菌种来源。
复苏操作:在无菌环境下打开冻干粉包装,向其中加入 1mL 无菌的胰酪大豆肉汤(TSB)或脑心浸液(BHI)培养基,轻轻吹吸 3-5 次,使冻干粉完全溶解,随后将菌液转移至无菌试管中,置于 35-37℃培养箱中静置培养 18-22 小时。待菌液出现明显浑浊,且 OD600 值达到 0.7-0.9(此时菌株处于对数生长期,生物学特性最稳定)时,取样涂片镜检确认链状球菌形态后,即可用于后续实验操作。
传代培养:用无菌接种环蘸取少量复苏后的菌液,在血琼脂平板上采用分区划线法进行接种,之后将平板置于 35-37℃培养箱中培养 18-20 小时。待平板上形成单菌落后,挑取形态典型(圆形、乳白色、光滑,具有 γ- 溶血或微弱 α- 溶血特征)的单菌落,可直接用于实验,也可转接至 TSA 斜面培养基,在 35-37℃培养箱中培养 24 小时后,置于 2-8℃冷藏保存。为避免菌株特性漂移,斜面菌种建议传代次数不超过 2 代(少于人源肠球菌),减少跨代培养导致的表型改变风险。
应用操作:在禽源微生物研究领域,可用于禽类肠道菌群结构分析、禽用益生菌筛选(如评估鸡肠球菌对禽类肠道的定植能力)及禽病相关研究(如探索鸡肠球菌与禽类病原菌的互作关系);在食品微生物质控领域,可作为阳性对照,验证禽肉制品中肠球菌污染检测方法(如选择性培养基分离、PCR 检测)的准确性,保障禽肉制品安全;在临床微生物鉴定领域,可用于区分人源与禽源肠球菌的鉴定方法验证(如基于鼠李糖发酵特性的鉴别实验),避免跨物种来源误判;在科研领域,适用于肠球菌跨物种进化机制研究、宿主适应性代谢途径解析,为肠球菌属物种多样性研究提供标准菌株支持。


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