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ATCC35667屎肠球菌Enterococcus faecium

一、产品名称官方名称为 ATCC 35667 屎肠球菌,拉丁学名为Enterococcus faecium,由美国典型培养物保藏中心(ATCC)保藏。作为屎肠球菌属中具有明确生物学特性的标准菌株,其遗传背景清晰、表型稳定,是临床微生物检测、食品微生物质控及屎肠球菌相关基础科研的常用菌株,尤其在区分粪肠球菌与屎肠球菌的鉴定方法验证中具有

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一、产品名称
官方名称为 ATCC 35667 屎肠球菌,拉丁学名Enterococcus faecium,由美国典型培养物保藏中心(ATCC)保藏。作为屎肠球菌属中具有明确生物学特性的标准菌株,其遗传背景清晰、表型稳定,是临床微生物检测、食品微生物质控及屎肠球菌相关基础科研的常用菌株,尤其在区分粪肠球菌与屎肠球菌的鉴定方法验证中具有重要参考价值。
二、产品特点
  1. 生物安全与来源:生物安全等级为 1 级,无强致病性,常规实验室规范操作(超净台接种、无菌耗材使用、操作后器具灭菌)下,对操作人员及环境无危害。该菌株分离自临床相关样本,其生物学特性与临床常见屎肠球菌高度一致,既能模拟肠道正常菌群中的屎肠球菌生理状态,也可用于研究屎肠球菌在特定条件下的表型变化,是连接基础科研与临床应用的重要菌株。

  1. 形态与培养特性:为革兰氏阳性球菌,显微镜下多呈短链状排列(链长通常比粪肠球菌略短),部分呈成对分布,无芽孢、无鞭毛,不具备自主运动能力,可通过链状形态与呈葡萄状簇集的葡萄球菌快速区分。兼性厌氧,对营养需求较低,在脑心浸液琼脂(BHI)、胰酪大豆琼脂(TSA)、血琼脂等常规培养基中均能良好生长;最适生长温度为 35-37℃,可耐受 10-45℃的宽温度范围,同时能在含 6.5% 氯化钠的高盐环境及 pH 9.6 的碱性环境中存活,符合肠球菌属的共性特征。菌落形态为圆形、表面光滑、颜色呈乳白色,直径约 0.8-1.5mm,在血琼脂平板上多表现为 γ- 溶血(无溶血环),少数情况下可能出现微弱 α- 溶血,这一溶血特性是其与多为 α- 溶血的粪肠球菌的重要鉴别依据之一。

  1. 生化特性:生化反应稳定且具有物种特异性,是屎肠球菌鉴别的关键标志:能发酵葡萄糖、蔗糖产酸不产气,部分情况下可发酵乳糖,不发酵甘露醇、山梨醇;触酶试验结果为阴性,胆汁七叶苷试验、精氨酸双水解试验均为阳性,PYR(吡咯烷酮芳基酰胺)试验阳性 —— 这些生化特征与粪肠球菌存在明显差异(如粪肠球菌可发酵甘露醇),是区分两种常见肠球菌的核心生化指标,确保其在微生物鉴定实验中可作为可靠的标准对照。

三、储存环境
  1. 未开封状态:产品主要以冻干粉形式进行真空密封包装,每支冻干粉含一定数量的活菌(具体活菌数量以 ATCC 官方标注为准),未开封时需置于 - 20℃以下冷冻环境保存;若需长期储存(超过 6 个月),建议放入 - 80℃冰箱,可最大程度保持菌株活性。储存过程中严禁反复冻融,反复冻融会破坏菌株细胞结构,导致活菌数量大幅减少,同时可能影响菌株的生化及药敏等关键表型,进而干扰实验结果的可靠性。冻干粉保质期以 ATCC 官方标注为准,通常为 2-3 年,在规范储存条件下,菌株活性衰减缓慢。

  1. 复苏后状态:菌株复苏后的菌液(经 TSB 或 BHI 培养基培养)或斜面培养物(接种于 TSA 斜面),需在 2-8℃冷藏环境中保存。由于该菌株代谢相对活跃,长期冷藏易因代谢产物积累导致活性下降,因此建议 7-10 天内进行一次传代培养,传代时需使用新鲜的培养基,确保菌株的生物学特性保持稳定,为后续实验提供可靠的菌种来源。

四、使用方法
  1. 复苏操作:在无菌环境下打开冻干粉包装,向其中加入 1mL 无菌的胰酪大豆肉汤(TSB)或脑心浸液(BHI)培养基,轻轻吹吸 3-5 次,使冻干粉完全溶解,随后将菌液转移至无菌试管中,置于 35-37℃培养箱中静置培养 18-20 小时。待菌液出现明显浑浊,且 OD600 值达到 0.8-1.0(此时菌株处于对数生长期,生物学特性最稳定)时,取样涂片镜检确认链状球菌形态后,即可用于后续实验操作。

  1. 传代培养:用无菌接种环蘸取少量复苏后的菌液,在血琼脂平板上采用分区划线法进行接种,之后将平板置于 35-37℃培养箱中培养 18 小时。待平板上形成单菌落后,挑取形态典型(圆形、乳白色、光滑,具有 γ- 溶血或微弱 α- 溶血特征)的单菌落,可直接用于实验,也可转接至 TSA 斜面培养基,在 35-37℃培养箱中培养 24 小时后,置于 2-8℃冷藏保存。为避免菌株特性漂移,斜面菌种建议传代次数不超过 3 代。

  1. 应用操作:在临床微生物检测领域,可用于验证抗菌药物敏感性测试(AST)相关设备及试剂(如药敏试纸条、全自动药敏分析仪)对屎肠球菌检测的准确性,依据 CLSI 标准判断检测结果是否可靠;在微生物鉴定方面,可作为阳性对照,用于验证生化鉴定试剂盒(如 API 20 STREP)、微生物质谱检测系统(MALDI-TOF MS)对屎肠球菌的鉴定能力,尤其适用于区分粪肠球菌与屎肠球菌的鉴定方法验证。在科研领域,适用于屎肠球菌代谢途径解析、耐药机制研究及肠道菌群互作机制探索,还可用于食品与环境领域中屎肠球菌污染检测方法的验证,确保检测结果的特异性和准确性。


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