生物安全与来源：生物安全等级为 1 级（BSL-1），无强致病性，广泛存在于动物肠道（如猪、鸡肠道）及发酵食品中，对人类仅在免疫低下时可能引发轻微感染，常规实验室规范操作（超净台接种、无菌耗材使用）下，对操作人员及环境无危害。该菌株分离自健康动物肠道样本，其生物学特性与动物源及食品中天然存在的海拉肠球菌高度一致，既能模拟食品发酵过程中肠球菌的代谢行为，也能适配临床肠球菌药敏质控场景，是跨领域应用的理想菌株。
形态与培养特性：属于革兰氏阳性球菌，归为肠球菌科，具有典型球菌形态与高环境适应性：
显微镜形态：菌体呈圆形或椭圆形，直径 0.6-1.2μm，常呈短链状排列（链长 2-4 个菌体，偶见单个或成对），无芽孢，部分菌株具有弱鞭毛（ATCC 10541 为非运动型），革兰氏染色呈均匀紫色（着色稳定，无褪色现象，可与革兰氏阴性菌快速区分）；
培养要求：兼性厌氧，对营养需求低，在胰酪大豆琼脂（TSA）、脑心浸液琼脂（BHI）、血琼脂及肠球菌选择性琼脂（如 KEN 培养基）中均能快速生长；最适生长温度 30-37℃（适配动物肠道与食品加工温度），可耐受 8-45℃宽温度范围，且能在 6.5% NaCl 高盐环境、pH 9.6 碱性环境及 40% 胆汁培养基中生长（肠球菌属共性，但该菌株耐盐性略强于粪肠球菌），生长速度快，37℃培养 18-24 小时形成明显菌落；
菌落形态：在 TSA 平板上，形成直径 1-1.5mm 的菌落，圆形、表面光滑干燥（区别于粪肠球菌的湿润菌落）、边缘整齐、呈乳白色不透明（质地较硬，挑取时不易拉丝）；在血琼脂平板上，表现为γ- 溶血（无溶血环，核心鉴别特征，区别于 α- 溶血的粪肠球菌）；在麦康凯琼脂上，因不发酵乳糖，菌落呈无色透明（可与发酵乳糖的大肠杆菌区分），通过溶血类型与菌落质地，可快速鉴别于其他肠球菌物种。
生化与药敏特性：生化反应具有物种特异性，是海拉肠球菌鉴定的核心参照：能发酵葡萄糖、蔗糖、甘露醇产酸不产气，不发酵乳糖、山梨醇（与粪肠球菌差异显著，粪肠球菌可发酵乳糖）；触酶试验阴性（区别于葡萄球菌）、氧化酶试验阴性；胆汁七叶苷试验阳性（能分解七叶苷形成黑色沉淀）、PYR（吡咯烷酮芳基酰胺）试验阳性、精氨酸双水解试验阴性（与粪肠球菌的阳性结果形成鲜明对比，核心鉴别指标）；不产生硫化氢，不分解尿素。核心优势在于药敏表型稳定且具有行业特异性：经 CLSI 标定，该菌株对青霉素类（氨苄西林）、氨基糖苷类（庆大霉素）、万古霉素等药物敏感，对四环素类药物（四环素）中度敏感，每种药物的 MIC 值均有明确标准范围（如氨苄西林 MIC 1-4μg/mL，万古霉素 MIC 0.5-2μg/mL），尤其适用于食品行业抗菌剂残留检测与临床肠球菌药敏方法对比验证。
未开封状态：产品主要以冻干粉（真空密封包装，含 10^7-10^8 CFU / 支活菌，含耐盐保护剂） 或标准化甘油菌悬液（20% 甘油，10^6 CFU/mL，-80℃专用） 形式供应：
冻干粉：未开封时需置于 - 20℃以下冷冻保存，长期储存（超过 1 年）建议放入 - 80℃冰箱，严禁反复冻融（反复冻融会使活菌率下降 60% 以上，破坏耐盐性与生化特性）；保质期以 ATCC 官方标注为准，通常为 3 年（专用保护剂可维持菌体耐盐表型，解冻后无特性漂移）；
甘油菌悬液：未开封时需直接置于 - 80℃冷冻保存，不可室温或冷藏放置（室温暴露 1 小时可导致活菌率下降 40%），保质期 2 年；解冻时需 37℃水浴快速溶解（1-2 分钟），解冻后轻轻颠倒混匀，一次性使用，剩余菌液需灭菌后丢弃，不可再次冷冻。
复苏后状态：复苏后的菌液（TSB 肉汤培养）需在 2-8℃冷藏保存，建议 7 天内使用完毕（该菌株代谢速率略慢于粪肠球菌，冷藏期更长）；复苏后的斜面培养物（TSA 斜面）需 2-8℃冷藏保存，建议 2-3 周内传代一次，传代时需使用无抗菌药物的新鲜培养基，避免药物残留影响药敏表型；使用前需通过涂片镜检（确认菌体短链形态正常、无杂菌）及生化预实验（验证精氨酸双水解试验阴性），确保菌株特性符合实验要求。
复苏操作：
冻干粉复苏：无菌环境下（超净台内），向冻干粉中加入 1mL 无菌胰酪大豆肉汤（TSB），轻轻吹吸 5-6 次使粉末完全溶解（避免产生气泡），转移至无菌试管，37℃培养箱振荡培养（180rpm）14-18 小时；待菌液呈均匀浑浊状（OD600 值约 0.5-0.7，处于对数生长期，药敏表型最稳定）、镜检可见典型短链状球菌时，即可用于实验；若需验证耐盐性，可将复苏菌液接种至含 6.5% NaCl 的 TSB 肉汤中，37℃培养 24 小时，观察菌液浑浊情况（应正常生长）；
甘油菌复苏：从 - 80℃取出甘油菌后，立即 37℃水浴解冻，用无菌枪头吸取 100μL 菌液接种至含 5mL TSB 肉汤的无菌试管中，37℃振荡培养 14-18 小时，待菌液浑浊后使用，无需再次稀释（浓度已标准化，适配食品质控与药敏实验）。
传代培养：在超净台内，用无菌接种环蘸取少量复苏菌液，在 TSA 平板上分区划线（确保单菌落分离，便于纯化菌株），37℃培养 18-24 小时；待平板形成单菌落后，挑取形态典型（圆形、乳白色、干燥、γ- 溶血）的单菌落，可直接用于实验，或转接至 TSA 斜面培养基，37℃培养 24 小时后，2-8℃冷藏保存；传代次数严格控制在 5 代以内（避免长期传代导致精氨酸双水解等关键生化特性漂移），每次传代后需通过血琼脂培养验证 γ- 溶血特征，确保菌株质量。
应用操作：
食品微生物质控：作为核心质控菌株，用于乳制品（如奶酪、酸奶）、发酵肉制品（如香肠）中肠球菌污染与发酵菌株鉴定，验证选择性培养基（如 KEN 培养基）的分离效果、实时荧光 PCR 检测的特异性；通过模拟食品发酵实验（将该菌株添加至原料乳中），评估其产酸能力与风味物质生成规律，为食品发酵工艺优化提供参照；
临床 AST 校准：作为肠球菌药敏对比菌株，用于验证全自动药敏分析仪（VITEK 2、BD Phoenix）对非粪肠球菌物种的检测准确性，尤其适用于通过药敏表型区分海拉肠球菌与粪肠球菌（如该菌株对乳糖发酵阴性，粪肠球菌阳性），避免临床鉴定失误；
微生物鉴定验证：作为阳性对照，校准生化鉴定试剂盒（如 API 20 Strep）、微生物质谱检测系统（MALDI-TOF MS）对海拉肠球菌的鉴定能力，重点验证精氨酸双水解试验、乳糖发酵试验等差异化指标，辅助区分肠球菌属内近缘物种；
动物微生态研究：在科研领域，用于动物肠道微生态互作实验（如与猪肠道乳酸菌共培养），研究其在动物肠道内的定植能力与对宿主营养吸收的影响；同时可作为动物源食品致病菌检测的阴性对照（如区分海拉肠球菌与致病性肠球菌），保障动物源食品安全。
客服1