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ATCCCL511流感嗜血杆菌Haemophilus influenzae

ATCC CL511 流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)产品简介一、产品名称官方名称为 ATCC CL511 流感嗜血杆菌,拉丁学名为Haemophilus influenzae(非荚膜型,NTHi,临床呼吸道感染适配株),由美国典型培养物保藏中心(ATCC)保藏。作为成人社区获得性呼吸道感染(急性咽炎、社区获得性肺炎)的专用标准菌株,其遗传背景清

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ATCC CL511 流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)产品简介

一、产品名称

官方名称为 ATCC CL511 流感嗜血杆菌,拉丁学名为Haemophilus influenzae(非荚膜型,NTHi,临床呼吸道感染适配株),由美国典型培养物保藏中心(ATCC)保藏。作为成人社区获得性呼吸道感染(急性咽炎、社区获得性肺炎)的专用标准菌株,其遗传背景清晰、呼吸道定植表型与药敏特性稳定,核心用于成人呼吸道样本微生物鉴定质控、社区感染相关抗菌药物敏感性测试(AST),同时在呼吸道黏膜黏附机制研究及基层医疗机构诊断试剂验证中具有关键价值,是连接成人社区呼吸道感染防控与基层临床检测的重要对照菌株。

二、产品特点

  1. 生物安全与来源:生物安全等级为 2 级(BSL-2),具社区感染倾向性,主要定植于成人鼻咽部,免疫力下降时引发局部呼吸道感染,极少导致侵袭性疾病(区别于 ATCC9833 Hib 的强侵袭性),操作需在生物安全柜内进行,器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自成人急性咽炎患者咽拭子样本,生物学特性与社区流行的 NTHi 分离株高度一致,其黏附呼吸道上皮细胞的能力显著,可模拟社区感染中 “定植 - 致病” 的典型过程,是研究社区呼吸道感染传播机制的理想模型。

  1. 形态与培养特性:革兰氏阴性球杆菌,具双因子营养依赖与非荚膜双重鉴别特征:

    • 显微镜形态:菌体呈短球杆状(0.3-0.5μm×0.7-1.4μm),较 ATCC9833 更短粗,单个或成对排列(无聚集生长,区别于聚集杆菌),无芽孢、无鞭毛,革兰氏染色呈均匀淡红色(易脱色,染色时间控制 15-25 秒,适配基层实验室快速染色操作),无荚膜(荚膜染色阴性,是区别于 ATCC9833 Hib 的关键特征)

    • 培养要求:兼性厌氧,需 5%-10% CO₂环境,最适培养基为巧克力琼脂、含 X/V 双因子的基层专用选择性琼脂(添加低浓度抗生素抑制口腔杂菌,适配咽拭子样本检测),最适温度 35-37℃,生长速度稳定(24-36 小时形成清晰菌落,较 ATCC9833 生长更快,适配快速检测需求),普通营养琼脂因缺乏 X/V 因子不生长(可作为基层实验室 “营养依赖特性” 教学案例);

    • 菌落形态:巧克力琼脂上呈圆形、表面光滑湿润、边缘整齐的浅灰白色半透明菌落(直径 0.4-0.9mm,小于 ATCC9833),质地柔软,挑取时易拉丝但无 “黏稠拉丝状”(因无荚膜多糖分泌),无溶血现象(接种绵羊血琼脂无溶血环,区别于副溶血性嗜血杆菌);菌落分散均匀生长,无堆叠现象,肉眼观察易与其他 NTHi 混淆,需通过生化反应进一步确认。

  1. 生化与药敏特性:生化反应具物种特异性:氧化酶阳性、触酶阳性,发酵葡萄糖、麦芽糖产酸不产气,不发酵乳糖、蔗糖(生化结果与 ATCC9833 一致,需结合荚膜特征区分);核心优势在于社区感染适配药敏表型:对基层常用抗菌药物(阿莫西林、阿奇霉素、头孢呋辛酯)均敏感,MIC 值高度标准化(阿莫西林 MIC 0.12-0.5μg/mL),无耐药基因携带(区别于医院获得性耐药株),药敏结果与社区感染治疗响应高度匹配,同时对呼吸道黏膜黏附相关蛋白(如 Hap 黏附素)表达稳定,是研究社区 NTHi 黏附机制的可靠模型。

三、储存环境

  1. 未开封状态:以冻干粉(真空包装,含 10^6-10^7 CFU / 支,含 X/V 因子与非荚膜菌株保护剂)或甘油菌悬液(20% 甘油,10^5 CFU/mL,-80℃专用)供应:

    • 冻干粉:-20℃以下冷冻保存,长期(>1 年)建议 - 80℃储存,严禁反复冻融(活菌率下降 60% 以上,破坏快速生长与黏附表型),保质期 4 年(因非荚膜表型更稳定,保质期长于部分荚膜型菌株);

    • 甘油菌:直接 - 80℃保存,室温暴露 30 分钟致活力下降 40%,保质期 2 年,解冻后可分装少量用于短期实验(适配基层实验室多次少量使用需求)。

  1. 复苏后状态:复苏菌液(含 X/V 因子的巧克力肉汤培养)2-8℃冷藏 7 天内使用(非荚膜菌株代谢更稳定,保存时间长于 ATCC9833);斜面培养物(含 X/V 因子的巧克力琼脂斜面)2-8℃冷藏 3 周内传代,传代需 5% CO₂环境,使用前需镜检确认短粗球杆状形态,并通过阿莫西林药敏预实验验证敏感性(确保表型未漂移)。

四、使用方法

  1. 复苏操作:生物安全柜内,冻干粉加 1mL 含 X/V 因子的巧克力肉汤溶解,37℃ 5% CO₂培养箱培养 24-36 小时;待菌液浑浊、镜检见短粗球杆菌,且接种巧克力琼脂形成均匀菌落时使用(复苏时间短,适配基层快速实验需求,复苏成功率≥95%)。

  1. 传代培养:挑取巧克力琼脂上的单菌落,划线接种新鲜巧克力琼脂平板,37℃ 5% CO₂培养 24-36 小时;斜面保存后 2-8℃冷藏,传代≤5 代(非荚膜表型稳定,传代次数多于 ATCC9833),每次传代后需通过氧化酶试验与麦芽糖发酵实验验证典型特性。

  1. 应用操作

    • 基层质控:用于基层医疗机构咽拭子、痰液样本鉴定系统(快速生化卡、胶体金抗原试纸)的性能验证,确保社区呼吸道感染样本中 NTHi 的快速准确检出,避免与 Hib 混淆;

    • 社区 AST 校准:校准基层常用 AST 试剂(药敏纸片、半定量药敏板)的 MIC 值,制定社区 NTHi 感染用药指导方案(如优先选择口服阿莫西林);

    • 黏附机制研究:用于 NTHi 黏附呼吸道上皮细胞(如 A549 细胞)机制研究,分析 Hap 黏附素等毒力因子在社区感染中的作用,为新型黏附抑制剂研发提供模型;

    • 教学培训:作为基层微生物实验室培训菌株,用于革兰氏染色、菌落形态观察、生化鉴定等基础操作教学,及 “社区感染菌与医院感染菌表型差异” 对比教学。


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