ATCC CL511 流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)产品简介
一、产品名称
二、产品特点
生物安全与来源:生物安全等级为 2 级(BSL-2),具社区感染倾向性,主要定植于成人鼻咽部,免疫力下降时引发局部呼吸道感染,极少导致侵袭性疾病(区别于 ATCC9833 Hib 的强侵袭性),操作需在生物安全柜内进行,器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自成人急性咽炎患者咽拭子样本,生物学特性与社区流行的 NTHi 分离株高度一致,其黏附呼吸道上皮细胞的能力显著,可模拟社区感染中 “定植 - 致病” 的典型过程,是研究社区呼吸道感染传播机制的理想模型。
形态与培养特性:革兰氏阴性球杆菌,具双因子营养依赖与非荚膜双重鉴别特征:
显微镜形态:菌体呈短球杆状(0.3-0.5μm×0.7-1.4μm),较 ATCC9833 更短粗,单个或成对排列(无聚集生长,区别于聚集杆菌),无芽孢、无鞭毛,革兰氏染色呈均匀淡红色(易脱色,染色时间控制 15-25 秒,适配基层实验室快速染色操作),无荚膜(荚膜染色阴性,是区别于 ATCC9833 Hib 的关键特征);
培养要求:兼性厌氧,需 5%-10% CO₂环境,最适培养基为巧克力琼脂、含 X/V 双因子的基层专用选择性琼脂(添加低浓度抗生素抑制口腔杂菌,适配咽拭子样本检测),最适温度 35-37℃,生长速度稳定(24-36 小时形成清晰菌落,较 ATCC9833 生长更快,适配快速检测需求),普通营养琼脂因缺乏 X/V 因子不生长(可作为基层实验室 “营养依赖特性” 教学案例);
菌落形态:巧克力琼脂上呈圆形、表面光滑湿润、边缘整齐的浅灰白色半透明菌落(直径 0.4-0.9mm,小于 ATCC9833),质地柔软,挑取时易拉丝但无 “黏稠拉丝状”(因无荚膜多糖分泌),无溶血现象(接种绵羊血琼脂无溶血环,区别于副溶血性嗜血杆菌);菌落分散均匀生长,无堆叠现象,肉眼观察易与其他 NTHi 混淆,需通过生化反应进一步确认。
生化与药敏特性:生化反应具物种特异性:氧化酶阳性、触酶阳性,发酵葡萄糖、麦芽糖产酸不产气,不发酵乳糖、蔗糖(生化结果与 ATCC9833 一致,需结合荚膜特征区分);核心优势在于社区感染适配药敏表型:对基层常用抗菌药物(阿莫西林、阿奇霉素、头孢呋辛酯)均敏感,MIC 值高度标准化(阿莫西林 MIC 0.12-0.5μg/mL),无耐药基因携带(区别于医院获得性耐药株),药敏结果与社区感染治疗响应高度匹配,同时对呼吸道黏膜黏附相关蛋白(如 Hap 黏附素)表达稳定,是研究社区 NTHi 黏附机制的可靠模型。
三、储存环境
未开封状态:以冻干粉(真空包装,含 10^6-10^7 CFU / 支,含 X/V 因子与非荚膜菌株保护剂)或甘油菌悬液(20% 甘油,10^5 CFU/mL,-80℃专用)供应:
冻干粉:-20℃以下冷冻保存,长期(>1 年)建议 - 80℃储存,严禁反复冻融(活菌率下降 60% 以上,破坏快速生长与黏附表型),保质期 4 年(因非荚膜表型更稳定,保质期长于部分荚膜型菌株);
甘油菌:直接 - 80℃保存,室温暴露 30 分钟致活力下降 40%,保质期 2 年,解冻后可分装少量用于短期实验(适配基层实验室多次少量使用需求)。
复苏后状态:复苏菌液(含 X/V 因子的巧克力肉汤培养)2-8℃冷藏 7 天内使用(非荚膜菌株代谢更稳定,保存时间长于 ATCC9833);斜面培养物(含 X/V 因子的巧克力琼脂斜面)2-8℃冷藏 3 周内传代,传代需 5% CO₂环境,使用前需镜检确认短粗球杆状形态,并通过阿莫西林药敏预实验验证敏感性(确保表型未漂移)。
四、使用方法
复苏操作:生物安全柜内,冻干粉加 1mL 含 X/V 因子的巧克力肉汤溶解,37℃ 5% CO₂培养箱培养 24-36 小时;待菌液浑浊、镜检见短粗球杆菌,且接种巧克力琼脂形成均匀菌落时使用(复苏时间短,适配基层快速实验需求,复苏成功率≥95%)。
传代培养:挑取巧克力琼脂上的单菌落,划线接种新鲜巧克力琼脂平板,37℃ 5% CO₂培养 24-36 小时;斜面保存后 2-8℃冷藏,传代≤5 代(非荚膜表型稳定,传代次数多于 ATCC9833),每次传代后需通过氧化酶试验与麦芽糖发酵实验验证典型特性。
应用操作:
基层质控:用于基层医疗机构咽拭子、痰液样本鉴定系统(快速生化卡、胶体金抗原试纸)的性能验证,确保社区呼吸道感染样本中 NTHi 的快速准确检出,避免与 Hib 混淆;
社区 AST 校准:校准基层常用 AST 试剂(药敏纸片、半定量药敏板)的 MIC 值,制定社区 NTHi 感染用药指导方案(如优先选择口服阿莫西林);
黏附机制研究:用于 NTHi 黏附呼吸道上皮细胞(如 A549 细胞)机制研究,分析 Hap 黏附素等毒力因子在社区感染中的作用,为新型黏附抑制剂研发提供模型;
教学培训:作为基层微生物实验室培训菌株,用于革兰氏染色、菌落形态观察、生化鉴定等基础操作教学,及 “社区感染菌与医院感染菌表型差异” 对比教学。


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