形态：革兰氏阳性球菌，显微镜下呈不规则葡萄串状排列（菌体分裂后不立即分离），无芽孢与鞭毛，部分菌体表面可形成薄荚膜（经荚膜染色可观察），大小约 0.7-1.1μm。在普通营养琼脂上形成直径 1.0-2.0mm 的乳白色至淡黄色菌落，质地厚实、表面光滑凸起，边缘整齐；在血琼脂培养基上表现为典型 β- 溶血（菌落周围形成 2-3mm 宽透明溶血环，溶血活性较金黄色葡萄球菌略弱）；在含 7.5% 氯化钠的甘露醇高盐琼脂培养基上可生长（耐盐性较强），但不发酵甘露醇（与金黄色葡萄球菌发酵甘露醇特性区分）；在麦康凯培养基上不生长（与革兰氏阴性肠道菌区分），此特性是重要鉴别标志。
生理生化：兼性厌氧微生物，最适生长温度 35-37℃（适配动物体温，也可在 30-40℃范围内生长），最适 pH 值 7.0-7.5，对营养要求低，在普通营养琼脂、LB 培养基、TSB 培养基中均可快速生长。生化反应中，触酶试验阳性（分解过氧化氢产氧，区别于链球菌），凝固酶试验阳性（能使犬血浆快速凝固，判定致病性），氧化酶试验阴性，硝酸盐还原试验阳性，甲基红试验阳性，VP 试验弱阳性；糖类发酵方面，可发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖（产酸不产气），不发酵甘露醇、乳糖、阿拉伯糖；毒力特性上，携带动物源感染相关毒力基因（如凝固酶基因 coa、溶血素基因 hla、生物膜形成基因 icaA），具较强生物膜黏附能力（易附着于动物皮肤黏膜、医疗器械表面），主要引发犬、猫等伴侣动物的皮肤脓肿、外耳道炎、尿路感染，偶可通过伤口接触传播给人类（引发免疫功能低下人群局部感染），是人兽共患病潜在风险菌株。
培养基：常规培养优先选用营养琼脂或 LB 培养基（35-37℃培养 18-24 小时，满足菌体快速增殖需求）；动物样本分离（如犬皮肤分泌物、耳道拭子）推荐使用血琼脂培养基（观察 β- 溶血特性，辅助鉴别）；药物敏感性试验（兽用药物）需采用 MH 培养基（符合 CLSI 兽医标准，确保药敏结果准确性）；生物膜研究可选用聚苯乙烯微孔板（利于生物膜附着与定量检测）；与金黄色葡萄球菌鉴别可使用甘露醇高盐琼脂培养基（利用甘露醇发酵差异区分）。
操作：固体培养置于 35-37℃恒温培养箱静置 18-24 小时，可形成形态典型的单菌落（血琼脂上重点观察 β- 溶血环）；液体培养采用 35-37℃、150-180rpm 摇床振荡培养 16-20 小时，培养后期菌液呈均匀浑浊状，菌浓度可达 10⁹-10¹⁰CFU/mL，且能最大程度保留凝固酶活性与生物膜形成能力。传代次数建议控制在 5 代以内，温度波动需≤±1℃，避免因传代过多导致凝固酶活性下降、溶血能力减弱或毒力基因表达异常。
短期（1-2 周）：取 35-37℃培养 18 小时的纯培养菌株（需确认凝固酶阳性、β- 溶血特性），接种至营养琼脂斜面培养基，35-37℃培养 12 小时后，密封斜面管口置于 4℃冰箱冷藏保存。每 3-4 天观察一次菌株状态，若发现菌落干燥、污染、溶血活性减弱或凝固酶阳性反应延迟，需及时重新接种（优先在 35-37℃条件下复壮），防止菌株失活或特性改变。
长期（3 年以上）：推荐两种高效保存方法：①冷冻干燥保存法：取对数生长期菌液（OD600=0.8-1.0），与含 10% 脱脂乳 + 0.5% 酵母提取物（保护菌体结构与酶活性）的复合保护剂按 1:1 体积比充分混匀，分装至无菌冷冻管（每管 0.5mL），经 - 20℃预冻 3 小时、-80℃冷冻 6 小时梯度降温后进行冷冻干燥，干燥完成后置于 - 80℃冰箱保存，保存期限可达 5-8 年，复苏后凝固酶活性与溶血特性保留率≥95%；②甘油冷冻保存法：将对数生长期菌液与无菌甘油（终浓度 20%）混合均匀，分装至无菌冷冻管（每管 1mL），直接放入 - 80℃冰箱保存，保存期限 3-5 年，操作简便（复苏时需将菌株接种至血琼脂培养基，35-37℃培养 24 小时复壮，恢复核心特性）。长期保存需每 12 个月复苏一次，复苏后通过革兰氏染色（确认形态与染色特性）、凝固酶试验、溶血试验、生化反应验证及动物源细胞黏附试验，全面确认菌株纯度、生理活性与致病特性，确保后续实验使用效果。
客服1