形态：革兰氏阳性球菌，显微镜下呈短链至中链状排列（多为 3-6 个菌体组成链，链长略长于变形链球菌的短链），无芽孢与鞭毛，多数菌株无荚膜（与变形链球菌的薄荚膜区分），大小约 0.7-1.0μm。在普通营养琼脂上生长良好，形成直径 1.0-1.5mm 的乳白色半透明菌落，质地柔软、表面光滑湿润（无葡聚糖合成，与变形链球菌的粗糙菌落明确区分），边缘整齐；在血琼脂培养基上表现为 α- 溶血（菌落周围形成 1-2mm 宽草绿色溶血环，溶血强度与变形链球菌相当但菌落形态不同）；在麦康凯培养基上不生长（与革兰氏阴性肠道菌区分）；在唾液链球菌选择性培养基（含叠氮钠、结晶紫）上可形成典型乳白色菌落（抑制杂菌，辅助鉴别），此中短链排列、光滑菌落、α- 溶血是关键鉴别标志。
生理生化：兼性厌氧微生物，最适生长温度 35-37℃（适配人体口腔温度，28-40℃范围内均可生长），最适 pH 值 6.5-7.5（耐酸性弱，仅能在 pH5.5 以上环境生长，与变形链球菌的强耐酸性明确区分），对营养要求中等，在含蛋白胨的培养基中生长更旺盛（无需蔗糖依赖，与变形链球菌的蔗糖需求区分）。生化反应中，触酶试验阴性（链球菌属共性，与葡萄球菌区分），氧化酶试验阴性，硝酸盐还原试验阴性，VP 试验阳性（与变形链球菌的 VP 阴性区分）；关键生化特性为发酵葡萄糖、蔗糖、乳糖（产酸能力弱，不合成葡聚糖），不发酵麦芽糖、甘露醇、阿拉伯糖，胆汁七叶苷试验阴性（与变形链球菌一致，与牛链球菌的阳性结果区分）；益生特性上，携带抗菌相关功能基因（如细菌素基因 blpAB、过氧化氢酶基因 katA，抑制变形链球菌等致病菌），对口腔黏膜上皮细胞黏附能力强（竞争性占据定植位点），代谢过程不产大量乳酸（无牙釉质脱矿风险，与变形链球菌的致龋特性明确区分），仅作为口腔正常共生菌存在，无致病性，还可通过分泌抗菌物质维持口腔微生态平衡。
培养基：常规培养优先选用 BHI 培养基（脑心浸液培养基，35-37℃培养 24-30 小时，无需添加蔗糖，与变形链球菌的含蔗糖培养基区分）；口腔样本（如唾液、舌背拭子）分离推荐使用唾液链球菌选择性培养基（含叠氮钠，抑制革兰氏阴性菌与葡萄球菌）；益生功能研究需使用共培养培养基（与变形链球菌等致病菌共培养，分析拮抗效果）；药物敏感性试验需采用 MH 琼脂培养基（无需加血，符合 CLSI 口腔微生物标准，与变形链球菌一致）；抗菌肽检测需使用无蛋白培养基（促进抗菌物质分泌）。
操作：固体培养置于 35-37℃、含 5% CO₂的恒温培养箱（CO₂促进菌体生长，与变形链球菌的 CO₂需求一致）静置 24-30 小时，可形成形态典型的光滑乳白色单菌落（选择性培养基上重点观察菌落质地与溶血情况）；液体培养采用 35-37℃、150-180rpm 摇床振荡培养 18-24 小时（振荡速率高于变形链球菌，促进菌体分散与营养吸收），培养后期菌液呈均匀浑浊状（无黏性沉淀，与变形链球菌的含葡聚糖沉淀区分），菌浓度可达 10⁹-10¹⁰CFU/mL，且能最大程度保留抗菌肽合成能力。传代次数建议控制在 5 代以内，温度波动需≤±1℃，避免因传代过多导致抗菌活性减弱或黏附能力下降。
短期（1-2 周）：取 35-37℃培养 24 小时的纯培养菌株（需确认 α- 溶血、光滑菌落、不产黏），接种至 BHI 琼脂斜面培养基，35℃培养 16 小时后，密封斜面管口置于 4℃冰箱冷藏保存。每 3-4 天观察一次菌株状态，若发现菌落干燥、污染、抗菌活性减弱，需及时重新接种（35-37℃、CO₂环境复壮），防止菌株失活。
长期（3 年以上）：推荐两种高效保存方法：①冷冻干燥保存法：取对数生长期菌液（OD600=0.8-1.0，培养 18 小时，BHI 培养基），与含 10% 脱脂乳 + 0.5% 酵母提取物的复合保护剂按 1:1 体积比充分混匀（无需添加蔗糖，与变形链球菌的保护剂区分），分装至无菌冷冻管（每管 0.5mL），经 - 20℃预冻 3 小时、-80℃冷冻 6 小时梯度降温后进行冷冻干燥，干燥完成后置于 - 80℃冰箱保存，保存期限可达 5-8 年，复苏后抗菌活性与黏附能力保留率≥95%；②甘油冷冻保存法：将对数生长期菌液与无菌甘油（终浓度 20%，与变形链球菌一致）混合均匀，分装至无菌冷冻管（每管 1mL），直接放入 - 80℃冰箱保存，保存期限 3-5 年，操作简便（复苏时需接种至 BHI 培养基与选择性培养基，同时验证核心特性）。长期保存需每 12 个月复苏一次，复苏后通过革兰氏染色（确认中短链排列）、溶血试验、生化反应验证、抗菌活性检测及黏膜黏附试验，全面确认菌株纯度、生理活性与益生特性，确保后续实验使用效果。
客服1