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副溶血性弧菌 WDCM 00037 Vibrio parahaemolyticus ATCC17802
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一、基础信息
ATCC17802 副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)隶属于弧菌科弧菌属,经 ATCC 多维度标准化鉴定(含 16S rRNA 基因测序、tdh 毒力基因分型及生化表型验证),WDCM 编号 00037 确保菌株全球溯源性,为典型海洋源性食源性致病菌(主要通过生食或未煮熟的海产品传播,引发急性胃肠炎),属于嗜盐性革兰氏阴性菌(与福赛坦纳菌的口腔厌氧属性明确区分)。该菌株遗传背景清晰,长期传代后核心特性(嗜盐生长、溶血活性、肠道侵袭能力)稳定无变异,核心特征为革兰氏阴性弧菌、需氧或兼性厌氧、具海洋环境适应性与强致病性。其专属菌株编号可实现实验全流程溯源,是副溶血性弧菌食源性感染机制研究(如肠道上皮侵袭通路、耐热直接溶血素作用机制)、海产品微生物安全检测试剂研发、食源性致病菌快速检测方法验证及抗菌药物敏感性试验的核心参照菌株,能保障不同实验室间海洋源性食源性致病菌相关实验数据的精准比对,尤其适合食品微生物学、预防医学等场景的标准化研究。
二、生物学特征
  1. 形态:革兰氏阴性弧菌,显微镜下呈弯曲杆状(多为逗号形或 “S” 形,大小约 0.5-0.8μm×1.5-3.0μm,与福赛坦纳菌的细长直杆状形态明确区分),无芽孢,具单极鞭毛(运动性强,呈 “穿梭样” 运动,与福赛坦纳菌的无鞭毛特性区分),部分菌株可形成黏液层(非荚膜结构)。在 TCBS 培养基(硫代硫酸盐 - 柠檬酸盐 - 胆盐 - 蔗糖琼脂)上生长良好,形成直径 1.0-2.0mm 的绿色菌落(不发酵蔗糖,与发酵蔗糖的霍乱弧菌黄色菌落区分),菌落表面光滑、边缘整齐,质地湿润(与福赛坦纳菌的黏性菌落差异显著);在普通营养琼脂上生长微弱(需添加氯化钠,与福赛坦纳菌的复杂营养需求区分);在血琼脂培养基上表现为 β- 溶血(部分菌株产生耐热直接溶血素 TDH,形成透明溶血环,与福赛坦纳菌的无溶血特性区分);在 SS 培养基上呈无色半透明菌落(因嗜盐特性生长较缓慢),此弯曲弧状形态、嗜盐生长、TCBS 培养基绿色菌落是关键鉴别标志。

  1. 生理生化:需氧或兼性厌氧微生物(与福赛坦纳菌的专性厌氧特性完全相反),最适生长温度 30-37℃(适配海产品储存与人体肠道温度,与福赛坦纳菌的 35-37℃偏好接近但更广),最适 pH 值 7.5-8.5(偏碱性,与福赛坦纳菌的中性 pH 适应区分),核心特性为嗜盐性:需在含 2%-3% 氯化钠的培养基中生长(无盐环境不生长,高于 6% 氯化钠生长受抑制,与福赛坦纳菌的非嗜盐特性明确区分),对营养要求中等,在含蛋白胨、酵母提取物的培养基中即可良好生长(无需福赛坦纳菌依赖的血液或生长因子)。生化反应中,触酶试验阳性(与福赛坦纳菌的触酶阴性区分),氧化酶试验阳性(弧菌属典型特征,与福赛坦纳菌的氧化酶阴性区分),硝酸盐还原试验阳性;关键生理特性为:发酵葡萄糖、麦芽糖(产酸不产气,与福赛坦纳菌的不发酵糖类区分),不发酵蔗糖、乳糖,分解明胶(产明胶酶),吲哚试验阳性;毒力特性上,携带食源性致病相关基因(如耐热直接溶血素基因 tdh、耐热相关溶血素基因 trh、黏附素基因 vp1680),对肠道上皮细胞黏附与侵袭能力强,通过分泌 TDH 引发肠道黏膜炎症与腹泻,主要引发人类急性胃肠炎(腹痛、腹泻、呕吐),严重时可致败血症(无牙周感染能力,与福赛坦纳菌的牙周致病特性区分),且仅通过海产品传播(与福赛坦纳菌的口腔定植传播区分)。

三、培养条件
  1. 培养基:常规培养优先选用 TCBS 培养基(含 3% 氯化钠,30-37℃培养 18-24 小时,快速鉴别弧菌种类,与福赛坦纳菌的 CDC 厌氧血琼脂区分);海产品样本(如虾、蟹、贝类)分离需使用碱性蛋白胨水(APW,含 3% 氯化钠,pH8.4,先增菌 6-8 小时后转接 TCBS 培养基,提升低浓度污染检出率);药物敏感性试验需采用 MH 培养基(添加 2% 氯化钠,符合 CLSI 弧菌药敏标准,与福赛坦纳菌的厌氧 MH 血琼脂区分);毒力研究需使用含肠道上皮细胞(如 Caco-2 细胞)的共培养体系(需维持 2% 氯化钠浓度,模拟体内感染环境)。

  1. 操作:固体培养置于 30-37℃恒温培养箱(需充足氧气,无需厌氧环境,与福赛坦纳菌的厌氧培养箱完全不同)静置 18-24 小时(培养周期远短于福赛坦纳菌的 5-7 天),可形成形态典型的绿色单菌落(TCBS 培养基上重点观察颜色与形态);液体培养采用 30-37℃、150-180rpm 摇床振荡培养 12-16 小时(高速振荡促进氧气供应,与福赛坦纳菌的静态厌氧培养区分),培养后期菌液呈均匀浑浊状(含菌体与代谢产物),菌浓度可达 10⁹-10¹⁰CFU/mL(高于福赛坦纳菌的菌浓度),且能最大程度保留 TDH 活性与肠道侵袭能力。传代次数建议控制在 5 代以内(与福赛坦纳菌的 4 代接近),传代过程需维持 2% 氯化钠浓度(避免无盐环境导致菌体失活),温度波动需≤±1℃。

四、保存条件
  1. 短期(1-2 周):取 30-37℃培养 18 小时的纯培养菌株(需确认革兰氏阴性弧状、氧化酶阳性、TCBS 绿色菌落),接种至含 2% 氯化钠的营养琼脂斜面培养基,30℃培养 12 小时后,密封斜面管口置于 4℃冰箱冷藏保存(无需厌氧环境,与福赛坦纳菌的充氮冷藏区分)。每 3-4 天观察一次菌株状态,若发现菌落干燥、污染或无盐环境暴露后生长异常,需及时在含 2% 氯化钠的培养基上重新接种复壮,防止菌株因盐浓度不适失活。

  1. 长期(3 年以上):推荐两种高效保存方法(需适配嗜盐特性,与福赛坦纳菌差异显著):①冷冻干燥保存法:取对数生长期菌液(培养 12 小时,用含 2% 氯化钠的生理盐水洗脱),与含 10% 脱脂乳 + 0.5% 酵母提取物 + 2% 氯化钠(维持嗜盐环境,保护菌体结构)的复合保护剂按 1:1 体积比充分混匀,分装至无菌冷冻管(每管 0.5mL),经 - 20℃预冻 3 小时、-80℃冷冻 6 小时梯度降温后进行冷冻干燥,干燥完成后置于 - 80℃冰箱保存(与福赛坦纳菌的 - 80℃保存一致,但保护剂含氯化钠),保存期限可达 5-8 年,复苏后 TDH 活性与嗜盐特性保留率≥95%;②甘油冷冻保存法:将对数生长期菌液与含 2% 氯化钠的无菌甘油(终浓度 20%)混合均匀,分装至无菌冷冻管(每管 1mL),直接放入 - 80℃冰箱保存,保存期限 3-5 年,操作简便(复苏时需接种至 TCBS 培养基,验证绿色菌落特性)。长期保存需每 12 个月复苏一次(与福赛坦纳菌的复苏周期一致),复苏后通过革兰氏染色(确认弧状形态)、氧化酶试验、TCBS 培养基培养(绿色菌落)、tdh 基因 PCR 检测及肠道细胞侵袭试验,全面确认菌株纯度、生理活性与致病特性,确保后续实验使用效果。



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每支菌株随附 COA 质检报告,标明批号等关键参数。

相关常用菌株:
ATCC 29213 金黄色葡萄球菌ATCC 8739 大肠杆菌ATCC 6538 金黄色葡萄球菌

免责声明:本页菌株信息整理自公开资料,仅供参考。具体菌株特性及操作要求请以 ATCC 官方数据库最新数据为准。本产品仅供科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗。使用者应遵守所在机构的生物安全管理规定,因不当使用造成的损失,本公司不承担责任。

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