生物安全与来源：生物安全等级为 1 级，虽携带特定耐药基因，但无强致病性，常规实验室规范操作（超净台接种、无菌耗材使用、操作后器具灭菌）下，对操作人员及环境无危害。该菌株分离自临床耐药感染患者样本，其耐药特性（如耐万古霉素）与临床常见耐药粪肠球菌高度一致，是模拟临床耐药菌株表型、开展耐药质控的核心菌株，填补了普通敏感菌株无法覆盖耐药质控场景的空白。
形态与培养特性：为革兰氏阳性球菌，显微镜下呈短链状排列（链长较 ATCC 49149 略长），部分成对分布，无芽孢、无鞭毛，不具备自主运动能力，可通过链状形态与葡萄球菌（葡萄状簇集）区分。兼性厌氧，营养需求低，在脑心浸液琼脂（BHI）、胰酪大豆琼脂（TSA）、血琼脂上均能旺盛生长；最适生长温度 35-37℃，耐受温度范围 10-45℃，可在 6.5% NaCl 高盐环境及 pH 9.6 碱性环境中生长（肠球菌属共性）。菌落呈圆形、表面光滑湿润、乳白色（直径 1-2mm），在血琼脂平板上表现为α- 溶血（草绿色溶血环），与敏感型粪肠球菌形态一致，仅能通过药敏试验区分耐药特性。
生化与耐药特性：生化反应符合粪肠球菌典型特征：发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇产酸不产气，触酶试验阴性，胆汁七叶苷试验、精氨酸双水解试验、PYR 试验均为阳性；核心优势在于稳定的耐药表型—— 经 ATCC 及 CLSI（美国临床和实验室标准协会）标定，该菌株对万古霉素耐药（MIC≥32μg/mL），同时对青霉素、氨苄西林等 β- 内酰胺类药物敏感性降低，其耐药机制明确（携带 vanA 耐药基因），是全球实验室验证万古霉素等药物耐药检测准确性的 “金标准对照”。
未开封状态：主要以冻干粉形式真空密封包装（含 10^6-10^7 CFU / 支活菌，含耐药基因保护剂），未开封时需 **-20℃以下冷冻保存 **，长期储存（超过 6 个月）建议置于 - 80℃冰箱，严禁反复冻融 —— 反复冻融会导致活菌率下降 60% 以上，更可能破坏耐药基因稳定性，导致耐药表型漂移，失去质控价值。冻干粉保质期以 ATCC 官方标注为准，通常为 3 年，规范储存下耐药特性可稳定保持。
复苏后状态：复苏后的菌液（TSB/BHI 培养基培养）或斜面培养物（TSA 斜面），需在 2-8℃冷藏保存，建议 5-7 天内传代一次（短于普通粪肠球菌），因耐药菌株代谢更活跃，长期冷藏易积累耐药相关代谢产物，影响药敏准确性；传代时需使用不含抗菌药物的新鲜培养基，避免药物诱导导致耐药表型改变。
复苏操作：无菌环境下打开冻干粉包装，加入 1mL 无菌胰酪大豆肉汤（TSB，不含任何抗菌药物），轻轻吹吸 5-6 次使粉末完全溶解，转移至无菌试管，35-37℃培养箱静置培养 18-20 小时，待菌液 OD600 值达 0.9-1.1（对数生长期，耐药表型最稳定），取样涂片镜检确认链状球菌形态后，即可用于实验。
传代培养：用无菌接种环取少量复苏菌液，在无药血琼脂平板上分区划线，35-37℃培养 18 小时，挑取 α- 溶血的典型单菌落（圆形、乳白色、光滑），可直接用于药敏实验，或转接至 TSA 斜面（35-37℃培养 24 小时），2-8℃冷藏保存；斜面菌种传代不超过 2 代，避免耐药基因丢失导致表型改变。
应用操作：作为耐药质控核心菌株，首要用于抗菌药物敏感性测试（AST）：依据 CLSI 标准，验证万古霉素、替考拉宁等糖肽类药物及 β- 内酰胺类药物的耐药检测准确性（如该菌株万古霉素 MIC 标准值为 32-128μg/mL，偏离则需校准设备或更换试剂）；其次用于耐药鉴定方法验证（如 PCR 检测 vanA 基因的阳性对照、质谱耐药表型库构建）；科研领域可用于粪肠球菌耐药机制研究（如 vanA 基因表达调控、耐药质粒转移规律）、新型抗耐药药物筛选，也可用于临床实验室耐药检测能力验证（室间质评样本制备）。
客服1